摘要 ：采用國(guó)際通用的高架十字迷宮焦慮動(dòng)物模型(EPM)，從行為學(xué)角度觀察了四個(gè)不同給藥劑 量酸棗仁湯對(duì)EPM大鼠的抗焦慮作用 。 結(jié)果顯示 ，酸棗仁湯確有抗焦慮作用 ，但此效應(yīng)不隨給藥劑量的增加而增強(qiáng)， 與一般化學(xué)**所遵循的量效關(guān)系規(guī)律不同 。
關(guān)鍵詞 ：酸棗仁湯 ；EPM ；行為學(xué) ；量效關(guān)系

      型號(hào)：XR-XG201-M

酸棗仁湯是臨床**肝血不足 、虛熱內(nèi)擾之“虛勞虛煩不得眠”的有名古 方 ，有關(guān)本方藥理實(shí)驗(yàn)方面的研究目前多局限于**催眠作用的初步觀察。針對(duì)本方臨床可用于**焦虛癥的經(jīng)驗(yàn)事實(shí)，本文采用國(guó)際上通用的焦慮動(dòng)物模 型—(EPM ，高架十字迷宮模型)，從行為學(xué)角度觀察了酸棗仁湯的抗焦慮作 用 ，并對(duì)其量效關(guān)系特點(diǎn)進(jìn)行了初步總結(jié)。
1 材 料
1．1 動(dòng)物健康雄性Wistar 大鼠90只，級(jí)別 SPF／VA F ，體重180±10g，許可 證號(hào) ：SCXK (京 )2002．0003，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供 。所有動(dòng)物提前一周購(gòu)入，本實(shí)驗(yàn)室常規(guī)飼養(yǎng)。
1．2 藥 物
1．2．1 酸棗仁湯 (SZR T) ：由酸棗仁18g、知母10g、茯苓 10g、川芎 5g、甘草3g 組成 (參考高等中醫(yī)院校五版《方劑學(xué)》教材) ，全部藥材購(gòu)自北京 同仁堂有限公司 。 常規(guī)方法煎煮后經(jīng)水提制成150％濃度 ，分裝**后4 攝氏度保存?zhèn)溆谩?br> 1．2 ．2 D ZP (D ia z epam Tablets，***片 ) ：京衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1996) 第 154011號(hào) ，北京益民制藥廠出品 。 ***36 片 ，研缽粉碎后以雙蒸水溶 解 ，加入2 ％羧甲基纖維素鈉1～2 滴充分混勻 ，配成10％濃度 。 4 攝氏度保存 ，使用前混搖均勻 。
1．3 行為學(xué)測(cè)試儀器大鼠高架十字迷宮(EPM ) ：采用國(guó)際通用方法制作。由兩個(gè)相對(duì)的開(kāi)放臂(open aim ，長(zhǎng)X 寬分別為50cm X 10cm ) 、兩個(gè)相對(duì)的封閉臂 (enclosed arm ，clos e aITI1，長(zhǎng) X 寬 ×高 分 別 為50cm ×10cm ×40cm ) 、一個(gè)連接四只臂的中央平臺(tái)(central platform ， 10cm ×10cm ) (即 ：開(kāi)放臂一中央平臺(tái)一開(kāi)放臂或封閉臂一 中央平臺(tái)一 封閉臂 ，此二者互 相垂直成為“十”(plus) 形狀 )和圍繞在開(kāi)放臂邊緣的1cm高的矮擋板組成 (目的是防止動(dòng)物在探究過(guò)程中不慎滑下迷宮) 。 本迷宮由國(guó)產(chǎn)有機(jī)玻璃制 作(8mm厚，上海欣軟信息科技有限公司提供) . 有機(jī)玻璃部分整體固定于(由黑色等長(zhǎng)寬 的“十”木架和不銹鋼可升降底座組成的)支架上，使迷宮底板調(diào)節(jié)到距實(shí)驗(yàn)室 地面50cm處 。
2 方 法
2 ．1 動(dòng) 物 處 置 及 分組 大 鼠每 籠 7 ～8 只 ，不 限食水 。 光 照 節(jié) 律 12L ：12D (6：00 ～18：00 ) ，室 溫 (18 ±2 ) ℃ ，保 持 安 靜 。 將 大 鼠隨 機(jī) 分 為 空 白對(duì) 照 、D ZP 、SZRT I 、 II 、 m 、 IV 共 6 組 ，每 組 15 只。 其 中 中 藥I 、 Ⅱ、 Ⅲ、 Ⅳ組 分 別 按 3．75g／ kg／ d、7．5g／ kg／ d、 15g／kg／ d 、30g／ kg／ d 給 予 SZR T 灌 胃 ，DZP 組 給 予 1mg／ kg灌 胃 ，空 白對(duì) 照 組 灌 服 等容 積 的生 理 鹽 水 。 各組 連續(xù)給 藥 10d，于 第 10d 在 末 次 給 藥 2h 后 8：o0 ～14 ：00A m 做行 為測(cè) 試 。 所有 動(dòng)物 均 提前 2h 進(jìn) 入 測(cè) 試 實(shí)驗(yàn)室 。
2 ．2 行 為學(xué)測(cè) 試
2 ．2 ．1 測(cè) 試 條 件 實(shí) 驗(yàn) 室 內(nèi)光 線 昏暗 (以 1．5m 距離處 能 區(qū)分 大 鼠細(xì) 微 活 動(dòng) 的 * 低亮 度 為 準(zhǔn) ) 并 保 持恒亮 ，室溫 20~C 左 右 ，保 持 安 靜 。 測(cè) 試 箱 放 置 于 實(shí)驗(yàn)室 一 角 ，周 圍布 以 2m 高 黑色單 調(diào) 背景 。 實(shí) 驗(yàn)過(guò) 程中有 一名人 員 搬 運(yùn) 動(dòng) 物 ，2 名 事 先 經(jīng) 過(guò) 實(shí) 驗(yàn) 記 錄 培訓(xùn)但 不 熟 悉 分組 情 況 的人 員在 距 離 測(cè)試 箱 1．5m 處分別 觀察 記 錄動(dòng) 物 的活動(dòng) 。
2 ．2 ．2 測(cè)試 指 標(biāo) 迷 宮 測(cè) 試 前 將 每 只 大 鼠 放 入 一個(gè) 60cm ×60cm ×35cm 塑 料盒 中，任 其 自由探 究 5min后迅 速 置于 EPM 的中 央平 臺(tái)處 ，使 其 頭 部 正對(duì) 其 中 一 個(gè) 開(kāi)放 臂 ，釋放 后 即開(kāi)始 記 錄下述 指標(biāo) ：①進(jìn) 入 開(kāi)放 臂次數(shù) (open arln entry ， OE ) ：進(jìn) 入到任一 開(kāi)放 臂 的次 數(shù) ，以 大 鼠 四個(gè) 爪 子 均 進(jìn) 入 到 臂 內(nèi)為 準(zhǔn) ，中途 一個(gè) 爪 子 從 該 臂 中 完全 退 出則 為 該 次 進(jìn)入活 動(dòng) 完 成 ； ② 進(jìn) 入 開(kāi) 放 臂 時(shí) 間 (open arln tim e，OT) ：進(jìn) 入 開(kāi)放臂 的 時(shí)間 ，單 位 ：秒 ； ③ 進(jìn) 入封 閉 臂 次數(shù) (cl0se ariB entr y ， CE ) ：進(jìn) 入 到任 一 封 閉臂 的 次數(shù) ，以大 鼠 四個(gè) 爪子 均進(jìn) 入 到 臂 內(nèi) 為準(zhǔn) ； ④ 進(jìn) 入 封 閉臂時(shí)間 (cl0se arln time， CT ) ：進(jìn) 入封 閉臂 的時(shí) 間 ，單 位 ：秒 ； ⑤ 向下 探 究 次 數(shù) (head— dipping) ：大 鼠置 身 于 中央平 臺(tái)或 開(kāi)放 臂 時(shí) ，一 邊 用 前 爪 握 住 迷 宮邊 緣 一 邊把頭部 和肩部 伸 出開(kāi)放 臂 的邊緣 向迷宮 下 面探 究 的行 為次數(shù) ； ⑥ 封 閉臂 后腿 直 立 次數(shù) (rearing) ：大 鼠在封 閉臂 前腿 抬起 以后 腿支 持使 身體 豎立 的次數(shù) 。由① ～④分 別 計(jì) 算 出 ：① 進(jìn) 入 開(kāi)放 臂 和封 閉 臂的總次 數(shù) (OE + CE ) ：表示 大 鼠的運(yùn) 動(dòng) 活力 (1ocom otoractivitv) ：②進(jìn) 入 開(kāi)放 臂 次 數(shù) 比例 (OE ％ ) ： 即 開(kāi)放 臂進(jìn) 入次 數(shù)／ (OE + CE ) ×100 ％ ；③ 開(kāi)放 臂 停 留 時(shí) 間 比例 (O T％) ，即開(kāi)放 臂 停 留時(shí)間／ (OT 十 CT ) ×100 ％。每 只大 鼠測(cè)試 5m in。 中 間用 濕 布 擦 拭 迷 宮 ，**糞 便 ，繼用 干布擦 凈 后再進(jìn) 行下 一 只大 鼠的測(cè)試 。
2 ．3 數(shù)據(jù) 的統(tǒng) 計(jì)處 理 所得 數(shù)據(jù) 均用 SPSS l1．0 forwindow s軟 件 統(tǒng) 計(jì) 處 理 ，采 用 單 因素 方 差 分 析 (one—w ay A N O V A ) 進(jìn)行 檢驗(yàn) 。

4 討 論
酸棗仁湯 (SZR T) 現(xiàn)代臨床除****癥外 ，還用于以情緒或神志障礙為主要表現(xiàn)的精神神經(jīng)系統(tǒng)**。焦慮癥是一種以廣泛和持續(xù)焦慮或反復(fù)發(fā)作的驚恐不安為主要特征的神經(jīng)癥 ，常伴以頭暈、胸悶、心悸等植物神經(jīng)功能癥狀和運(yùn)動(dòng)性緊張 ，一般屬于中醫(yī)“ 心神不寧”的范 疇 ，臨證可從調(diào)神角度辨治 。SZRT 具有養(yǎng)心** 、清熱除煩功效，與目前中醫(yī)**焦慮癥的基本治法相吻合 ，其在精 神**方面 的臨床有效運(yùn)用也提示本方可能具有潛在的抗焦慮效用。
本研究引入的高架十字迷宮模型 ，為抗焦慮研究中公認(rèn)的非條件反射模型。 它利用動(dòng)物對(duì)新異環(huán)境的探究特性相對(duì)高懸敞開(kāi)臂的恐懼心理，形成動(dòng)物的矛 盾行為 ，實(shí)驗(yàn)指標(biāo)以進(jìn)入開(kāi)放臂的百分?jǐn)?shù)(O E ％) 和在開(kāi)放臂停留時(shí)間的百 分?jǐn)?shù) (O T％ )反映動(dòng)物的焦慮狀態(tài) ，焦慮動(dòng)物的 O E ％和 OT ％明 顯 降低 ，經(jīng)典抗焦慮**則使兩者升高；開(kāi)放臂和中央平臺(tái)區(qū)head—dipping 次數(shù)則反映了在非保護(hù)區(qū)內(nèi)的探索行為 ，代表動(dòng)物對(duì)陌生環(huán)境的好奇探究或因恐懼而尋求逃避，與焦慮程度有一定相關(guān)性；開(kāi)放臂和封閉臂總進(jìn)入次數(shù)反映動(dòng)物總的運(yùn)動(dòng)能力 ，封閉臂 rearing值也 可用來(lái)觀察**有無(wú)**作用及**強(qiáng)度 ，但多年來(lái)關(guān)于抗焦慮藥究竟如何影響這兩個(gè)指標(biāo)一直存在爭(zhēng)議 。
本實(shí)驗(yàn)觀察到： SZRT 7．5g／kg 可顯著增加EPM大鼠OE％和OT％值 ，明顯 提 高大 鼠在 開(kāi) 放 臂 和 中央平 臺(tái) 區(qū) head— dipping次數(shù)及封閉臂的 rearing值 ；15g／kg SZRT 可增加EPM大鼠 OE ％和 head— dipping次數(shù) ，但對(duì)OT ％影響不明顯 ； 與空白對(duì)照組比較 ，SZ R T 3 ．75g／kg 、30g／ kg對(duì) O E ％ 、 O T ％ 、head．dipping和 rearing 影響均不明 顯 。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明 ： SZRT 在7 ．5g／ kg ～15g／ kg 劑量范圍內(nèi) ，具 有一定的抗焦慮效應(yīng) ，與DZP的作用方向一致 ，從對(duì)EPM大鼠各項(xiàng)指標(biāo)影響 結(jié)果看 ， 以7．5g／kg 劑量效果*優(yōu) ，而在3 ．75／kg及 3Og／kg 劑量 時(shí)SZRT幾乎不表現(xiàn)抗焦慮效用 。
本研究證 實(shí) ：中藥酸棗仁湯確有抗焦慮作用 ．從小劑量開(kāi)始此效用逐漸增 強(qiáng)，但達(dá)到一定劑量后 ，抗焦慮效應(yīng)并不再伴隨劑量的增加而增強(qiáng) ，這與一 般化學(xué)**所遵循的量效關(guān)系規(guī)律不同，其發(fā)生機(jī)制尚有待進(jìn)一步研究 。