神經(jīng)肽是生物體內(nèi)重要的生物活性分子，廣泛參與機(jī)體生理病理過程，成為諸多**的潛在**靶點(diǎn)。三葉因子( trefoil factor，TFF) 屬神經(jīng)肽家族，是一類富含半胱氨酸的小分子肽。因其分子構(gòu)象都有一個(gè)或多個(gè)“三葉草形結(jié)構(gòu)”，又稱三葉肽( trefoil peptide) 。TFFs 主要包括乳腺癌相關(guān)肽( TFF1/PS2) 、解痙多肽( TFF2 /SP) 和腸三葉因子( TFF3 / ITF)3 個(gè)家族成員。1982 年**個(gè)家族成員在乳腺癌 MCF －7 細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，命名為乳腺相關(guān)肽( breast cancer associated pS2 peptide，PS2/TFF1)。同 年，在 豬 胰 島 中 發(fā) 現(xiàn) 了 解 痙 多 肽( spasmolytic polypeptide，SP/TFF2) 。1991 年，Suemeri等**在鼠體內(nèi)空腸組織中發(fā)現(xiàn) TFF3。TFF3 結(jié)構(gòu)保守，具有抗酸、抗蛋白酶和抗熱分解等特性，在胃、腸道、胰島、呼吸道、唾液腺、**組織均發(fā)現(xiàn)了TFF3 的表達(dá)。在哺乳動(dòng)物體內(nèi)，TFF3 在保護(hù)粘膜上皮細(xì)胞、抗凋亡、**調(diào)節(jié)、抑制腫瘤生長等生理病理過程中發(fā)揮重要作用。TFF3 可能是腫瘤，特別是消化系統(tǒng)腫瘤的預(yù)測因素和腫瘤抑制因素。TFF3 在**神經(jīng)系統(tǒng)的表達(dá)具有組織特異性和階段特異性，提示其可能與機(jī)體****神經(jīng)系統(tǒng)活動(dòng)調(diào)節(jié)有關(guān)。

1 TFF3 的分子結(jié)構(gòu)及其**神經(jīng)系統(tǒng)的表達(dá)

TFF3 分子由 59 個(gè)氨基酸殘基組成，含有一個(gè)P 結(jié)構(gòu)域，存在單體及二聚體形式，單體分子量約為6. 7KD，兩個(gè)單體分子可以通過分子間二硫鍵( SCys58－SCys58) 共價(jià)連接，二聚體分子量約為 13KD。對(duì)其組織定位的早期研究發(fā)現(xiàn)，TFF3 主要在小腸以及結(jié)腸的杯狀細(xì)胞、胃竇粘膜中表達(dá)，在胰腺、前列腺、乳腺、唾液腺等腺體中有較低水平表達(dá)。利用原位雜交、定量 PCＲ 等方法，Ogata 等發(fā)現(xiàn)，垂體組織有TFF3 存在，提示其可能作為神經(jīng)肽發(fā)揮作用。此外，**神經(jīng)系統(tǒng) TFF3 的表達(dá)位點(diǎn)還包括下丘腦的視上核( hypothalamic supraoptic nucleus，SON) 和室旁核( paraventricular nucleus，PVN) 的大細(xì)胞性神經(jīng)元，海馬( CA1、CA2、CA3 亞區(qū)的神經(jīng)元胞體和部分纖維) 、杏仁核、皮層等腦區(qū)。在 PVN 腦區(qū)，99% 的催產(chǎn)素能神經(jīng)元表達(dá) TFF3; 垂體前葉中的TFF3 與催產(chǎn)素共存于同一分泌小泡中，提示其可能與催產(chǎn)素具有相似的生理功能或者存在交互作用。同時(shí)，TFF3 在上述腦區(qū)的表達(dá)呈現(xiàn)階段特異性，而 TFF3 表達(dá)涉及腦區(qū)在生物體攝食、學(xué)習(xí)記憶、情緒、神經(jīng) － *** － **調(diào)節(jié)等生理過程發(fā)揮重要作用，由此推測，TFF3 可能作為神經(jīng)遞質(zhì)/調(diào)質(zhì)或**影響**神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育，調(diào)控機(jī)體**神經(jīng)系統(tǒng)功能。

2 TFF3 的**調(diào)節(jié)功能

TFF3 的功能研究主要集中在外周組織的生理病理過程。在生理狀態(tài)下，TFF3 主要由胃腸道黏膜組織及其他黏膜組織中的分泌細(xì)胞分泌，TFF3 通過增加上皮細(xì)胞遷移、抑制上皮細(xì)胞凋亡來促進(jìn)損傷組織的修復(fù)和**。當(dāng)機(jī)體發(fā)生消化系統(tǒng)炎癥、腫瘤等病理性改變時(shí)，TFF3 會(huì)伴隨病理過程而發(fā)生異常表達(dá)和/或持續(xù)分泌，而 TFF3 的表達(dá)變化與**發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后相關(guān)。因此，TFF3 被認(rèn)為是消化道相關(guān)**的診斷及預(yù)后的潛在臨床標(biāo)志物。目前有關(guān) TFF3 參與**神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)控的研究較少。1998 年，Mashimo 等利用基因敲除技術(shù)發(fā)現(xiàn)，TFF3敲除小鼠不表現(xiàn)出明顯的神經(jīng)發(fā)育和功能異常。2008 年，Lubka M 等證實(shí)，TFF3 敲除能引起小鼠聽力損傷，并加速老年聾，提示 TFF3 在感覺神經(jīng)信號(hào)傳遞系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用。作者所在研究小組近年來一直關(guān)注 TFF3 的**神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)控功能，通過外源性給予重組 TFF3 的方法，評(píng)價(jià) TFF3 **調(diào)節(jié)功能及其可能機(jī)制，取得了系列發(fā)現(xiàn)。

2． 1 TFF3 與情緒調(diào)節(jié)

1999 年，Schwarzberg H 小組**報(bào)道了 TFF3參與焦 慮 行 為 的 調(diào) 節(jié)。利 用 被 動(dòng) 回 避 測 試( passive avoidance test) 和高架十字迷宮大鼠模型( elevated plus maze，EPM) 和核團(tuán)定位給藥技術(shù)，雙側(cè)杏仁核微注射低劑量( 2 ×6 pg) 的重組 TFF3 具有抗焦慮的作用，而高劑量( 2 ×60 pg) 的 TFF3 具有致焦慮的作用，證實(shí)**神經(jīng)系統(tǒng) TFF3 參與焦慮行為的雙向調(diào)節(jié)，也進(jìn)一步提示神經(jīng)肽 TFF3 **調(diào)控功能的復(fù)雜性。Shi 等利用新穎抑制攝食( novelty suppress feeding，NSF) 實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，系統(tǒng)給予重組 TFF3 能顯著降低大鼠攝食潛伏期，進(jìn)一步證實(shí) TFF3 參與焦慮行為的調(diào)節(jié)。

2． 2 TFF3 與應(yīng)激

應(yīng)激會(huì)引起機(jī)體神經(jīng) － *** － **的適應(yīng)性改變，嚴(yán)重的應(yīng)激導(dǎo)致抑郁和焦慮。神經(jīng)肽廣泛參與應(yīng)激反應(yīng)。利用 ELISA 方法，Shi 等證實(shí)慢性不可預(yù)見性應(yīng)激可以導(dǎo)致基底外側(cè)杏仁核中 TFF3 的表達(dá)下降，提示 TFF3 可能參與應(yīng)激反應(yīng)。研究者隨后利用急性應(yīng)激小鼠模型( 懸尾測試和強(qiáng)迫游泳測試) **發(fā)現(xiàn)，系統(tǒng)給予重組 TFF3 能顯著降低小鼠的懸尾不動(dòng)和游泳不動(dòng)時(shí)間，提示 TFF3 具有抗抑郁活性。Shi 等采用經(jīng)典的慢性不可預(yù)見性應(yīng)激大鼠模型，對(duì) TFF3 的抗抑郁作用及其機(jī)制進(jìn)行了深入研究，單次給予 TFF3 能顯著逆轉(zhuǎn)慢性應(yīng)激誘導(dǎo)的抑郁樣行為，進(jìn)一步明確 TFF3 具有良好的抗抑郁作用，同時(shí)發(fā)現(xiàn)，TFF3 的抗抑郁作用由基底外側(cè)杏仁核腦區(qū) PI3K － Akt 信號(hào)通路介導(dǎo)。

2． 3 TFF3 與學(xué)習(xí)記憶

神經(jīng)肽也廣泛參與認(rèn)知、學(xué)習(xí)記憶等過程。2012 年，Shi 等**報(bào)道了 TFF3 參與學(xué)習(xí)記憶的研究 結(jié) 果。 利 用 新 穎 物 體 識(shí) 別 ( novel objectrecognition，NOＲ) 小鼠模型，**證實(shí)了訓(xùn)練前系統(tǒng)給予重組 TFF3 能顯著提高小鼠學(xué)習(xí)記憶能力，并且能夠使記憶保持的更持久，進(jìn)一步提示 TFF3 參與**神經(jīng)系統(tǒng)**功能的調(diào)節(jié)。三葉因子的**功能研究進(jìn)展

2． 4 TFF3 與成癮

**成癮是一種慢性復(fù)發(fā)性腦病，**成癮者戒斷后的軀體癥狀和心理渴**誘導(dǎo)其復(fù)吸的重要因素，多種神經(jīng)肽參與**成癮及其戒斷后的復(fù)吸過程。史海水等采用納洛酮催促戒斷的方法，**發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)給予 TFF3 能顯著改善急性戒斷后嗎依賴小鼠的軀體癥狀，包括跳躍行為和體重下降等，結(jié)果提示，TFF3 參與**成癮戒斷后的調(diào)節(jié)過程。利用條件性位置偏愛和行為敏化大鼠模型，外源性給予 TFF3 能顯著增強(qiáng)***的獎(jiǎng)賞效應(yīng)，表現(xiàn)為更容易形成位置偏愛和特定時(shí)間內(nèi)自發(fā)活動(dòng)的進(jìn)一步增強(qiáng)。系統(tǒng)給予 TFF3 能顯著提高由***誘導(dǎo)的伏隔核腦區(qū)多巴胺含量增加，而對(duì)該腦區(qū)5 － 羥色胺和去甲腎上腺素含量沒有顯著影響，提示TFF3 強(qiáng)化***獎(jiǎng)賞效應(yīng)可能與其對(duì)多巴胺系統(tǒng)的調(diào)節(jié)有關(guān)( 結(jié)果待發(fā)表) 。

3 TFF3 與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

來自外周組織的研究表明，TFF3 可直接通過自身未知受體或間接地通過表皮生長因子受體( epidermal growth factor receptor，EGFＲ) 調(diào)節(jié)磷脂酰肌醇 － 3 激 酶 ( phosphatidylinositol － 3 － kinasePI3K) 、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶( extracellular signal －regulated kinase，EＲK) 及其下游多種信號(hào)分子活性，包括: 核轉(zhuǎn)錄因子 － κB ( nuclear factorκB ，NF －κB) 、哺乳動(dòng)物的雷帕霉素受體( mammalian target ofrapamycin，mTOＲ) 、糖原合成酶激酶 － 3β ( glycogensynthase kinase 3βGSK － 3β) 等，進(jìn)而參與細(xì)胞遷移、細(xì)胞周期調(diào)控和轉(zhuǎn)錄水平的基因表達(dá)調(diào)控等過程( 如圖 1 所示) 。Wang 等研究發(fā)現(xiàn)，趨化因子受體 CXCＲ4 與 TFF2 具有較低的親和活性三葉因子的**功能研究進(jìn)展，提示 TFF3的作用發(fā)揮可能與趨化因子受體家族存在關(guān)聯(lián)。趨化因子受體在**神經(jīng)系統(tǒng)廣泛分布，與**反應(yīng)、神經(jīng)元可塑性、神經(jīng)細(xì)胞增殖和存活等病理生理過程密切相關(guān)。Lubka M 等利用基因敲除技術(shù)證實(shí): TFF3 敲除小鼠伴隨 Pttg1 表達(dá)下調(diào)和 Serpina3n表達(dá)上調(diào)。Shi 等發(fā)現(xiàn)，系統(tǒng)給予 TFF3 可以顯著提高特定腦區(qū)磷酸化 Akt 水平，而 PI3K 的特異性抑制劑 LY294002 能顯著逆轉(zhuǎn) TFF3 對(duì) Akt 的活性調(diào)節(jié)，進(jìn)而阻斷 TFF3 的抗抑郁作用。

4 展望三葉因子的**功能研究進(jìn)展

盡管已有研究鑒定出多種 TFF3 相互作用蛋白，但沒有充分證據(jù)它們是 TFF3 的直接受體，**神經(jīng)系統(tǒng)是否存在 TFF3 的直接受體? TFF3 系統(tǒng)給藥能引起特定腦區(qū)活化，進(jìn)而發(fā)揮**調(diào)控功能，TFF3 是否能直接透過血腦屏障，發(fā)揮**調(diào)控作用? 此外，除了已有的 TFF3 參與應(yīng)激反應(yīng)、情緒調(diào)節(jié)、學(xué)習(xí)記憶等過程外，神經(jīng)肽 TFF3 在睡眠、神經(jīng)***調(diào)節(jié)等生理過程中是否發(fā)揮作用還不得而知。隨著研究的深入，神經(jīng)肽 TFF3 很可能會(huì)成為神經(jīng)精神**發(fā)生機(jī)制研究和****研發(fā)的新靶點(diǎn)。