小鼠曠場和條件性恐懼實(shí)驗(yàn)方法介紹
1、曠場實(shí)驗(yàn)
敞箱(40cm*40cm*40cm),分為中心區(qū)和周圍區(qū)。將小鼠放入箱內(nèi)底面中心,同時(shí)進(jìn)行攝像和計(jì)時(shí)(5分鐘),記錄小鼠的運(yùn)動(dòng)距離,中心區(qū)域活動(dòng)時(shí)間。每只小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用75%酒精擦拭敞箱。
2、條件恐懼性實(shí)驗(yàn)
fcs測試是一種比較敏感的用于研究小型嚙齒類動(dòng)物(大鼠、小鼠)條件恐懼學(xué)習(xí)記憶的實(shí)驗(yàn)。在條件性恐懼訓(xùn)練后,對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行環(huán)境聯(lián)系性(context-related)記憶測試和聲音聯(lián)系性(tone-related)記憶測試,分別反映海馬依賴的和非海馬依賴的學(xué)習(xí)記憶。
本實(shí)驗(yàn)第1天將小鼠放入箱內(nèi)(箱子底部為銅條柵欄,可通電),適應(yīng)2min后給予單一頻率聲音刺激(3.0KHZ,65db,30s),*后2s同時(shí)給予不可逃避足底電擊(0.7mA,2s),聲音與電擊同時(shí)結(jié)束。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后讓小鼠在箱內(nèi)繼續(xù)停留2min,隨后放回飼養(yǎng)籠。每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用75%酒精擦拭箱底。24h后將已建立條件恐懼的小鼠放入原來的箱內(nèi),不給予任何刺激,記錄3min內(nèi)環(huán)境誘發(fā)僵直行為(contextual freezing,主要反映海馬依賴性記憶)。2h后改變箱內(nèi)環(huán)境(箱底放一白板,并改變箱壁的顏色),再次將小鼠放入其中,適應(yīng)后再給予相同強(qiáng)度的聲音刺激3min,記錄小鼠3min內(nèi)聲音誘發(fā)僵直行為(cue freezing,主要反映非海馬依賴性記憶)。僵直行為定義為除呼吸外無其他運(yùn)動(dòng)行為。記錄環(huán)境和聲音誘發(fā)僵直時(shí)間百分比。
注:本文摘錄自臨床麻醉學(xué)雜志《異氟醚麻醉所致認(rèn)知損害的微清蛋白中間神經(jīng)元相關(guān)機(jī)制初步研究》,文中所述曠場實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)和條件性恐懼實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)均為上海欣軟信息科技有限公司研發(fā)的SuperMaze軟件和SuperFcs軟件。
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