條件性恐懼實(shí)驗(yàn)測(cè)試方案
模型的制備：將大鼠放在動(dòng)物飼養(yǎng)室內(nèi)適應(yīng)一周。飼養(yǎng)室內(nèi)溫度為24±0.5℃，濕度為60%，光：暗周期為12h：12h（光照時(shí)間為8：00-20：00），隨機(jī)分籠單獨(dú)飼養(yǎng)，自由進(jìn)食、飲水。
A．條件性恐懼的建立：將大鼠分別放入斯金納箱（箱子底部為銅條柵欄，可通電）內(nèi),適應(yīng)2分鐘后再給予單一頻率聲音信號(hào)(4.5KHZ,60dB,30S，該聲音由美國(guó)Adobe公司的Adobe Audition2.0軟件制作)適應(yīng)4次（兩次聲音間隔1-4分鐘）,然后再給予6次以聲音信號(hào)為提示的不可逃避足底電擊(1mA,5s)，聲音與電擊同時(shí)結(jié)束，兩次聲音間隔為1-4分鐘，共28分鐘。動(dòng)物在被電擊時(shí)發(fā)生驚叫、驚跳、逃避等,聽到聲音提示時(shí)出現(xiàn)慌張、逃避或者僵立行為（除呼吸外無其他運(yùn)動(dòng)行為），這樣建成恐懼動(dòng)物模型（以下簡(jiǎn)稱建模）。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后讓動(dòng)物在斯金納箱內(nèi)繼續(xù)停留2分鐘后放回飼養(yǎng)籠飼養(yǎng)。每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用90%酒精擦拭箱底，用濕布擦拭箱壁，以避免殘留氣味對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)大鼠的影響。
B．恐懼消退訓(xùn)練：24h后將已經(jīng)建立條件性恐懼的動(dòng)物再次放入斯金納箱內(nèi)，僅給予聲音信號(hào)16次，兩次聲音間隔為1-2分鐘，共24分鐘?？謶謱?duì)照組在對(duì)應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)放進(jìn)斯金納箱內(nèi)24分鐘，不進(jìn)行消退訓(xùn)練（不給聲音刺激）。
C．條件性恐懼消退保持測(cè)試：恐懼對(duì)照組和恐懼消退組（注：此時(shí)大鼠分為兩組：恐懼消退組和對(duì)照組）分別在恐懼消退訓(xùn)練后的第1、3、7天將大鼠放在訓(xùn)練箱內(nèi)，給予5次聲音信號(hào)，時(shí)間間隔為0.5s，記錄3分鐘內(nèi)的不僵立時(shí)間，計(jì)算3分鐘內(nèi)不僵立時(shí)間百分比，作為消退保持成績(jī)。百分比越高，表明消退保持成績(jī)?cè)胶谩?br>
需要記錄的實(shí)驗(yàn)測(cè)試指標(biāo)：
1）Freezing相關(guān)：實(shí)驗(yàn)時(shí)間、freezing總次數(shù)、每次freezing時(shí)間點(diǎn)、每次freezing持續(xù)時(shí)間、freezing總時(shí)間、freezing時(shí)間占總時(shí)間的百分比。
2）活動(dòng)度相關(guān)：總實(shí)驗(yàn)時(shí)間、總距離(cm)、總平均速度(cm/s)、每個(gè)階段的時(shí)間、距離及平均速度。
附：XR-XC404型恐懼記憶實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)
場(chǎng)景恐懼實(shí)驗(yàn)刺激器同時(shí)支持正弦波恒流電刺激與雙極性直流脈沖恒流電刺激的輸出，這2種刺激方式在很多國(guó)外文獻(xiàn)上有明確規(guī)定
電刺激均為9電極擾頻（交替）輸出，可有效避免實(shí)驗(yàn)動(dòng)物“刺激盲區(qū)”與電柵欄短路
標(biāo)配隔音箱，隔音箱采用高分子密度板制作，帶有通風(fēng)裝置
恐懼實(shí)驗(yàn)箱尺寸可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)**定制
恐懼實(shí)驗(yàn)箱底部配有黑白2種可拖拉屎尿托盤，設(shè)計(jì)人性化
恐懼實(shí)驗(yàn)裝置可以選配光刺激模塊，增加實(shí)驗(yàn)的條件刺激方式
