穿梭箱實(shí)驗(yàn)對(duì)不同實(shí)驗(yàn)條件的影響機(jī)制
本研究在考察實(shí)驗(yàn)條件對(duì)于KM鼠學(xué)習(xí)記憶影響的基礎(chǔ)上,又考察了大鼠不同鼠種對(duì)學(xué)習(xí)記憶形成的差異。結(jié)果表明:對(duì)于同樣的實(shí)驗(yàn)條件設(shè)置,兩組的學(xué)習(xí)成績(jī)相比差異具有顯著性,Wistar大鼠較SD大鼠更易形成條件反射;考慮到鼠類(lèi)晝伏夜行的生活習(xí)性,本研究又考察了訓(xùn)練時(shí)辰對(duì)于Wistar大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響,結(jié)果表明:白天訓(xùn)練組與夜晚訓(xùn)練組的學(xué)習(xí)成績(jī)比較,差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,訓(xùn)練時(shí)辰對(duì)于Wistar大鼠的記憶獲得沒(méi)有影響。
對(duì)于記憶保持,本研究只考察了KM小鼠及Wistar大鼠訓(xùn)練達(dá)標(biāo)(ROA>0.75)后間隔不同天數(shù)的記憶保持情況。在考察的時(shí)間間隔內(nèi),其學(xué)習(xí)與記憶成績(jī)相比差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說(shuō)明其記憶在獲得后,相對(duì)穩(wěn)定且能夠保持較長(zhǎng)一段時(shí)間。但其記憶到底能保持多久,還有待于今后進(jìn)一步研究。SD大鼠在已知的實(shí)驗(yàn)條件下及規(guī)定的訓(xùn)練時(shí)間內(nèi)沒(méi)有達(dá)標(biāo),所以本研究未考察其記憶保持情況。
總之,大小鼠穿梭箱的訓(xùn)練成績(jī)受諸多因素的影響。相同的實(shí)驗(yàn)條件設(shè)置,不同的鼠種、品系或者相同的品系,不同的實(shí)驗(yàn)條件設(shè)置均對(duì)大小鼠的學(xué)習(xí)記憶的形成產(chǎn)生較大影響。因此,實(shí)驗(yàn)者應(yīng)因鼠而異,制訂適宜的訓(xùn)練方案,使其盡快達(dá)到訓(xùn)練標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)儀器如圖所示:
XR-XC105型
實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)分為記憶獲得和記憶保持兩個(gè)階段。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)首先設(shè)定實(shí)驗(yàn)參數(shù),包括**期(非條件刺激與條件刺激之間的間隔時(shí)間)、條件刺激(高頻率的穩(wěn)定聲音刺激或者閃光燈強(qiáng)光刺激)時(shí)間、非條件刺激(電擊)時(shí)間及強(qiáng)度、穿梭次數(shù)等。在記憶獲得階段首先把實(shí)驗(yàn)鼠放入左側(cè)室,接近并面向端壁,適應(yīng)5 min后開(kāi)始訓(xùn)練。穿梭實(shí)驗(yàn)視頻分析系統(tǒng)按照預(yù)先設(shè)定好的程序,先給一個(gè)可以察覺(jué)的條件刺激,持續(xù)一定時(shí)間后,如果實(shí)驗(yàn)鼠仍停留在同側(cè),則再給一個(gè)非條件刺激。動(dòng)物受到電擊后將從圓洞逃至對(duì)側(cè)一定時(shí)間后,對(duì)側(cè)再給予條件和非條件刺激,如此反復(fù)。每只鼠連續(xù)訓(xùn)練10 d,每天穿梭幾十次。一次穿梭訓(xùn)練結(jié)束后,間隔一定
時(shí)間開(kāi)始下一次訓(xùn)練。經(jīng)過(guò)反復(fù)訓(xùn)練后,只給條件刺激,動(dòng)物即逃到對(duì)側(cè)**區(qū)以逃避電擊,此即形成了條件反射或稱(chēng)主動(dòng)回避反應(yīng)。全部訓(xùn)練結(jié)束后,計(jì)算機(jī)顯示出每次穿梭的軌跡,記錄大(小)鼠的主動(dòng)回避反應(yīng)(active avoidance response,AAR,即動(dòng)物在條件刺激后,非條件刺激到來(lái)之前就產(chǎn)生的穿梭)次數(shù);被動(dòng)回避反應(yīng)(passive avoidance response,PAR,即實(shí)驗(yàn)鼠在非條件刺激后才產(chǎn)生的穿梭)次數(shù);逃避失敗(escape failure,EF,指實(shí)驗(yàn)鼠在條件刺
激和非條件刺激的過(guò)程中仍然停留在同側(cè)箱中)次數(shù)。以AAR作為其學(xué)習(xí)記憶成績(jī)的主要評(píng)價(jià)指標(biāo),并計(jì)算主動(dòng)回避反應(yīng)率(rate of AAR,ROA,即主動(dòng)回避反應(yīng)次數(shù)AAR占穿梭總數(shù)N的百分比),統(tǒng)計(jì)ROA>0.75(達(dá)標(biāo))的動(dòng)物的百分比.
記憶獲得實(shí)驗(yàn)
不同條件刺激和條件刺激時(shí)長(zhǎng)對(duì)KM小鼠記憶獲得的影響 KM 鼠32只,隨機(jī)分為3組。SG5s組:11只,給予聲光刺激5 S,**期5 S,交流電(0.3 mA)擊5 S;G5s組:10只,給予光刺激5 S,**期5 S,交流電(0.3 mA)擊5 S;G10s組:11只,給予光刺激10 S,**期5 S,交流電(0.3 mA)擊5s。每組連續(xù)訓(xùn)練10 d,每天1次,每次穿梭3O次。訓(xùn)練成績(jī)用AAR表示。統(tǒng)計(jì)訓(xùn)練10 d中動(dòng)物的達(dá)標(biāo)(ROA>0.75)百分率,比較訓(xùn)練d 7兩組間動(dòng)物AAR的差異。
鼠種對(duì)于大鼠記憶獲得的影響 實(shí)驗(yàn)分2組,Wistar組:Wistar大鼠10只,給予聲光刺激10 S,**期30 S,交流電(0.7 mA)擊lOs;SD組:sD大鼠10只,刺激條件同Wistar組。每組連續(xù)訓(xùn)練10d,每天1次,每次穿梭20次。
記憶保持實(shí)驗(yàn)
KM小鼠記憶保持情況考察 KM小鼠70只,按照“1.4.1”中G10s組的實(shí)驗(yàn)條件連續(xù)訓(xùn)練14d,每天1次,每次穿梭30次。選取ROA>0.75的小鼠36只,用同樣的訓(xùn)練方法再連續(xù)訓(xùn)練3 d。取其AAR的均值作為小鼠記憶獲得成績(jī)(0 day)。然后隨機(jī)分為6組,每組6只,分別用于考察間隔2、4、6、11、14、21 d后記憶保持情況,以AAR作為記憶保持成績(jī)?cè)u(píng)估指標(biāo)。
訓(xùn)練時(shí)辰及鼠種對(duì)于大鼠記憶獲得的影響