分為訓(xùn)練和測(cè)試兩階段
(一)訓(xùn)練階段(**天)
1.調(diào)試儀器,以確保格柵地板有電流刺激,擴(kuò)音器有聲音刺激,并分別記錄電流強(qiáng)度和聲音強(qiáng)度(分貝)。
2.將大鼠放入條件恐懼箱2min(A相),記錄這*初2min內(nèi)動(dòng)物的凝滯(freezing)時(shí)間作基線。
3.接著加入卡嗒聲,80Db,30s(B相)。
4.緊接著再給予電擊,0.35mA,2s(C相),完成一輪訓(xùn)練。如需要多輪訓(xùn)練,則重復(fù)A、B、C三相訓(xùn)練即可。
5.記錄整個(gè)訓(xùn)練階段動(dòng)物凝滯時(shí)間(s),用以測(cè)量動(dòng)物的非條件恐懼(unconditioned fear)。
6.將大鼠移開操作箱。用70%的酒精或4%醋酸溶液徹底清潔操作箱,以備進(jìn)行下一批動(dòng)物的訓(xùn)練。
(二)測(cè)試階段 在訓(xùn)練后的**天進(jìn)行,包括關(guān)聯(lián)(context)測(cè)試、變更關(guān)聯(lián)(altered context)或條件刺激前(pre-conditioning-stimulus,pre-CS)測(cè)試以及條件刺激(conditioning stimulus,CS)測(cè)試。測(cè)試階段沒有電擊刺激。關(guān)聯(lián)測(cè)試和變更關(guān)聯(lián)測(cè)試中也沒有聽覺條件刺激,但每只動(dòng)物所用的操作箱應(yīng)與訓(xùn)練階段的相同。
1.關(guān)聯(lián)測(cè)試 將動(dòng)物放入箱內(nèi),計(jì)算機(jī)自動(dòng)記錄動(dòng)物的凝滯行為。若用人工觀察,則觀察者(應(yīng)不知道動(dòng)物的處理或基因型)用靜聲秒表通過箱門上的貓眼(小窗口)觀察動(dòng)物的行為并計(jì)分:凝滯為1分,活動(dòng)(moving)為0分(也有只記錄凝滯時(shí)間)。每10秒觀察一次,共5min,這樣可記錄到30次(bout)可能的凝滯(即*大凝滯得分為30分)。用在這一階段記錄到的、動(dòng)物在同一操作箱內(nèi)的凝滯時(shí)間測(cè)量動(dòng)物的關(guān)聯(lián)條件恐懼(contextually conditioned fear)。此為關(guān)聯(lián)測(cè)試。觀察結(jié)束后將動(dòng)物放回籠內(nèi),清潔操作箱,進(jìn)行下一只動(dòng)物的觀察。
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