大鼠和小鼠抑郁行為檢測(cè)方法是基于興趣缺失、心境低落、絕望和無(wú)價(jià)值感為主要特征而設(shè)計(jì)的?？茖W(xué)家建立了多種行為實(shí)驗(yàn)方法用于檢測(cè)動(dòng)物的情緒行為改變。抑郁行為實(shí)驗(yàn)方法主要包括糖水偏愛(ài)、新奇環(huán)境攝食抑制、新奇物體探索、曠場(chǎng)、強(qiáng)迫游泳、懸尾、獲得性無(wú)助等。

實(shí)驗(yàn)介紹

獲得性無(wú)助實(shí)驗(yàn)是指當(dāng)大鼠接受連續(xù)無(wú)法控制或預(yù)知的厭惡性刺激(電擊)后，將其放在可以逃避電擊的環(huán)境中時(shí)，呈現(xiàn)出的逃避行為欠缺的現(xiàn)象，同時(shí)還伴有體重減輕、運(yùn)動(dòng)性活動(dòng)減少、攻擊性降低等行為改變 。該實(shí)驗(yàn)是評(píng)價(jià)抑郁行為一種比較理想的實(shí)驗(yàn)方法 ，可廣泛應(yīng)用于抑郁發(fā)病機(jī)制研究，以及新藥、保健產(chǎn)品研發(fā)，在**醫(yī)學(xué)中也具有重要應(yīng)用價(jià)值。

實(shí)驗(yàn)儀器

學(xué)習(xí)無(wú)助箱由透明的（或者黑色）有機(jī)玻璃制成一個(gè)有蓋的30cm*30cm*40cm的籠子，籠底由不銹鋼柵（1.5 cm 間隔）制成，側(cè)壁及頂蓋上均有通氣孔。籠底的不銹鋼柵可通電流，電流由發(fā)放命令的控制盒控制，一般發(fā)放的電流強(qiáng)度為0.8mA，持續(xù)1-15s，每1min 15 s給一次電擊(電擊持續(xù)時(shí)間和間隔時(shí)間均為隨機(jī)性的)。

實(shí)驗(yàn)方法

本實(shí)驗(yàn)主要分為模型的建立期和條件性回避反應(yīng)測(cè)試期：

(1)模型建立期

a：實(shí)驗(yàn)當(dāng)天動(dòng)物應(yīng)放入測(cè)試箱(A室或 B室)中，適應(yīng)5min。

b：動(dòng)物應(yīng)在電擊 箱內(nèi)接受30~60個(gè)運(yùn)行周期的循環(huán)電擊。每個(gè)運(yùn)行周期應(yīng)包括無(wú)信號(hào)不可逃避的雙室足底電擊期和間歇期，電擊時(shí)間應(yīng)為3~10s,間歇期時(shí)間應(yīng)為3~10s。電刺激頻率宜為5~15Hz,刺激電流強(qiáng)度應(yīng)為大鼠0. 65~1. 80mA,推薦 0. 8mA;小鼠0. 15~0. 6mA,推薦 0. 25mA。如采用電壓，大鼠應(yīng)為65~70 V,小鼠 30 ~ 36V。

上海欣軟SuperLH學(xué)習(xí)無(wú)助實(shí)驗(yàn)（習(xí)得性無(wú)助測(cè)試）中，需要對(duì)動(dòng)物加以聲刺激、光刺激以及電刺激等外部線索。
聲刺激：喇叭輸出，頻率可調(diào)，音量可調(diào)；
光刺激（可選）：LED光源，光強(qiáng)連續(xù)可調(diào)，12V2W，使用光刺激器時(shí)，需使用紅外濾光鏡和紅外照明；
電刺激：0～4mA恒流，0.01mA調(diào)整步長(zhǎng)，64Hz正弦波刺激信號(hào)，9電極擾頻（交替）輸出，脈沖寬度30ms。

(2)條件性回避反應(yīng)測(cè)試期

a：模型建立結(jié)束 后第2天應(yīng)進(jìn)行條件性回避反應(yīng)測(cè)試。

b：動(dòng)物放入 測(cè)試箱(A 側(cè)或 B 側(cè))中，適應(yīng)5min后，進(jìn)行15 ~ 30個(gè)運(yùn)行周期的實(shí)驗(yàn)。

c：每個(gè)運(yùn)行周期的總時(shí)間 應(yīng)為30s,包括3~10s的條件刺激(燈光/ 聲音)、3~10s的條件刺激+非條件刺激(電擊條件同前)和 5~25s間歇期(不給以任何刺激)。

d：重復(fù)上述步 驟連續(xù) 2~3d。

(1) 逃避失敗次數(shù)(times of evasion failures)

動(dòng)物在設(shè)定的非條件刺激持續(xù)時(shí)間內(nèi)未完成回避反應(yīng)的總次數(shù)；逃避失敗次數(shù)與動(dòng)物的抑郁程度成正比。抑郁行為判斷標(biāo)準(zhǔn)：30次電擊，動(dòng)物逃避失敗次數(shù)大于25次或者與對(duì)照組相比具有顯著性增加 (P < 0. 05)。

(2) 逃避潛伏期( escape latency)

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后， 動(dòng)物第1次穿梭至對(duì)側(cè)測(cè)試箱的時(shí)間；逃避潛伏期與動(dòng)物的抑郁程度成正比。抑郁行為判斷標(biāo)準(zhǔn)：逃避潛伏期大于15s 或者與對(duì)照組相比具有顯著性 增加(P < 0. 05)。

(3) 其他

主動(dòng)回避次數(shù)、**區(qū)時(shí)間(無(wú)電區(qū)域)、運(yùn)動(dòng)總時(shí)間(實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物處于運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的時(shí)間)、運(yùn)動(dòng)總路程(實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物物理位移的總和) 等實(shí)驗(yàn)指標(biāo)亦作為抑郁行為輔助評(píng)價(jià)指標(biāo)。這些指標(biāo)值越少，表明動(dòng)物抑郁程度越重。

• 習(xí)得性無(wú)助范式是一種廣泛使用的抑郁癥模型，可用于轉(zhuǎn)基因、行為和藥理學(xué)研究。

• 它基于以下觀察結(jié)果：當(dāng)面對(duì)不可避免的厭惡刺激時(shí)，動(dòng)物會(huì)對(duì)新的厭惡但可逃避的壓力源產(chǎn)生隨后的應(yīng)對(duì)缺陷。

• 動(dòng)物受到隨機(jī)的輕微電擊。無(wú)助的動(dòng)物不會(huì)終止試驗(yàn)或逃脫，而是接受不可避免的壓力源。

• 測(cè)試評(píng)分包括逃避或終止失敗的次數(shù)、在施加電擊后逃避或終止試驗(yàn)的潛伏期、主動(dòng)回避（在電擊期間退出或終止）和被動(dòng)回避反應(yīng)（考慮到壓力源的預(yù)期）。

• 該協(xié)議可以進(jìn)行調(diào)整以適應(yīng)研究的具體情況，并且已經(jīng)通過(guò)抗抑郁藥得到了一致的驗(yàn)證。

引用參考

[1]姜寧[1],張亦文[1],姚彩虹[1],黃紅[1],劉新民[1],.大小鼠抑郁行為實(shí)驗(yàn)方法概述[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2021,29(6)

附：SuperLH習(xí)得性無(wú)助實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)特點(diǎn)

1、大鼠和小鼠

在學(xué)習(xí)無(wú)助實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，大鼠和小鼠表現(xiàn)出不同的狀態(tài)行為。SuperLH軟件可以同時(shí)應(yīng)用于大鼠和小鼠測(cè)試。

2、高通量

SuperLH學(xué)習(xí)無(wú)助實(shí)驗(yàn)軟件支持1-16只動(dòng)物同時(shí)開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。所有的刺激方案可以預(yù)先設(shè)定，所有測(cè)試動(dòng)物同時(shí)開(kāi)始和同時(shí)停止刺激測(cè)試。

3、靈活性

用戶可以預(yù)先選擇刺激類型，如聲刺激、電刺激、光刺激以及聲電刺激組合等多種形式的刺激類型?？梢宰远x每種刺激的開(kāi)始時(shí)間以及持續(xù)時(shí)長(zhǎng)。

4、隨機(jī)性

用戶可以設(shè)置電流刺激大小為隨機(jī)值或者固定值。通過(guò)自定義每次刺激的間隔時(shí)長(zhǎng)為隨機(jī)值等，實(shí)現(xiàn)無(wú)助模型測(cè)試的隨機(jī)原理。

5、電流恒流刺激

電流刺激范圍0--4mA，精度0.01mA，電流采用正弦波恒流刺激，九路循環(huán)杜絕電擊盲區(qū)。

6、聲音刺激

用戶可以設(shè)定聲音刺激的頻率和刺激大小，以及聲刺激的持續(xù)時(shí)長(zhǎng)。

如需了解SuperLH習(xí)得性無(wú)助實(shí)驗(yàn)軟件和條件控制器的詳細(xì)功能，可以聯(lián)系我們**工程師：

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