抑郁癥是一種包括多種精神和軀體癥狀的情感 性精神障礙, 發(fā)病率 3% ~ 5%, Zi殺率 12% ~ 14%  , 并有逐年上升趨勢(shì), 嚴(yán)重危害人類健康。抑郁癥動(dòng)物模型對(duì)抗抑郁藥的研究和開(kāi)發(fā)具有至關(guān)重 要的作用。本研究采用的小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)快速、 簡(jiǎn)便, 是具有較高可信度的模型之一, 廣泛用于抗抑郁藥的篩選和評(píng)價(jià)。但是, 目前實(shí)驗(yàn)方法學(xué)和文獻(xiàn)對(duì)小鼠強(qiáng)迫游泳的實(shí)驗(yàn)條件的報(bào)道并不統(tǒng)一, 給后來(lái)的研究帶來(lái)困惑。為此, 本研究選定3 種基本 的實(shí)驗(yàn)條件即預(yù)先訓(xùn)練、體重和水深, 觀察其對(duì)雄性 ICR 小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)的敏感性是否有差別, 對(duì)實(shí) 驗(yàn)結(jié)果是否有影響。

 

一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備及流程方法

1、動(dòng)物 

ICR 小鼠, 雄性, 體重( 20~ 24 g 和 24~ 28 g) , 由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。合格 證號(hào): SCXK( 京) 2002- 0001。飼養(yǎng)室溫( 22度左右)  , 自然光照, 實(shí)驗(yàn)前12 h 禁食, 不禁水。 

2、方法 

小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn): 將小鼠放入高 20 cm、直徑14 cm 的圓柱形玻璃缸中, 每缸 1 只, 缸中 水深根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求分別采用 6 cm、10 cm 和 15 cm, 水溫( 25 度以內(nèi))  , 訓(xùn)練組小鼠實(shí)驗(yàn)前訓(xùn)練游泳 15 min, 隨后取出放回籠中, 24 h 后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)前 30 min 給藥組腹腔注射不同劑量的鹽酸丙咪嗪, 對(duì) 照組腹腔注射蒸餾水。實(shí)驗(yàn)時(shí), 小鼠在缸中游泳 6 min, 記錄后 4 min 內(nèi)小鼠的累計(jì)不動(dòng)時(shí)間。不動(dòng)時(shí) 間( immobility time) 是指小鼠在水中停止掙扎、呈漂 浮狀態(tài), 或僅有細(xì)小的肢體運(yùn)動(dòng)以保持頭部浮在水面。

二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1、預(yù)先訓(xùn)練對(duì)小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響 小鼠體重 20~ 24 g, 水深 10 cm。在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn) 中, 實(shí)驗(yàn)前 24 h 經(jīng) 15 min 游泳訓(xùn)練的小鼠中, 給藥 組( 鹽酸丙咪嗪 10 mgkg- 1 ) 的不動(dòng)時(shí)間比對(duì)照組短 ( P < 0. 05) ; 而未經(jīng)游泳訓(xùn)練的小鼠中, 給藥組的 不動(dòng)時(shí)間與對(duì)照組相似( P > 0. 05) 。見(jiàn)表 1。

2、體重對(duì)小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響 

小鼠 實(shí)驗(yàn)前 24 h 進(jìn)行 15 min 游泳訓(xùn)練, 水深 10 cm。體 重 20 ~ 24 g 小 鼠中, 給 藥組 ( 鹽 酸 丙咪 嗪 10 mgkg- 1 ) 的不動(dòng)時(shí)間比對(duì)照組短( P < 0. 01) 。而 體重 24~ 28 g 的小鼠中, 給藥組與對(duì)照組相似( P > 0. 05) 。見(jiàn)表 2。

3、水深對(duì)強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響 

小鼠體重 20~ 24 g, 測(cè)試前 24 h 均給予 15 min 游泳訓(xùn)練, 訓(xùn)練 時(shí)的水深與實(shí)驗(yàn)時(shí)的水深一致。在水深 6 cm 和水 深 15 cm 時(shí), 僅鹽酸丙咪嗪 10 mgkg- 1組的不動(dòng)時(shí) 間比對(duì)照組短; 而在水深10 cm 時(shí), 鹽酸丙咪嗪5 mg kg- 1和 10 mgkg- 1組不動(dòng)時(shí)間均比對(duì)照組短, 且似 呈劑量依賴性。見(jiàn)表 3。

三、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

 小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)是 Porsolt 于 1977 年創(chuàng)建的 一種抑郁癥動(dòng)物模型 。實(shí)驗(yàn)中, 小鼠被迫在一個(gè) 局限的空間內(nèi)游泳, 它們首先試圖逃跑, 隨后處于一 種漂浮不動(dòng)狀態(tài), 放棄逃脫的希望, 即行為絕望 ( behavioral despair) 。目前普遍認(rèn)為, 這種行為絕望 ( 小鼠在強(qiáng)迫游泳期間的不動(dòng)時(shí)間) 類似于人類抑郁 癥的成分。臨床有效的抗抑郁藥可縮短小鼠的 不動(dòng)時(shí)間, 而已知的能導(dǎo)致人抑郁的藥wu則增加小 鼠的不動(dòng)時(shí)間。

因?yàn)樾∈蟮男袨閷?shí)驗(yàn)結(jié)果變異較大, 除種屬差 異外, 與實(shí)驗(yàn)過(guò)程的條件不同有很大關(guān)系。ICR 小鼠作為國(guó)際公認(rèn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與以前經(jīng)常應(yīng)用的昆 明種小鼠比較, 體型小、敏感性較高、游泳不動(dòng)時(shí)間 短 。我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn) ICR 小鼠具有活躍、 好動(dòng)的特點(diǎn)。經(jīng)游泳訓(xùn)練后強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ鸵子?建立, 而且標(biāo)準(zhǔn)差小, 給藥組與對(duì)照組相比差異有顯 著性。本研究采用抗抑郁藥鹽酸丙咪嗪, 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示: 在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中, 實(shí)驗(yàn)前 24 h 經(jīng) 15 min 游 泳訓(xùn)練的 ICR 雄性小鼠, 給藥組比對(duì)照組不動(dòng)時(shí)間 短, 而未經(jīng)訓(xùn)練的 2 組小鼠間差異無(wú)顯著性。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果還表明: 體重 20~ 24 g 的 ICR 小鼠中 給藥組的不動(dòng)時(shí)間與對(duì)照組相比差異有顯著性, 而 體重 24~ 28 g 的 2 組小鼠的不動(dòng)時(shí)間相似。體重較 大, 在游泳時(shí)浮力也較大, 更易表現(xiàn)為不動(dòng)狀態(tài), 使 藥wu的作用變得不敏感。

在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中, 水的深度是關(guān)鍵, Zui好使動(dòng) 物后爪剛觸及水底, 但又不能支撐身體為宜。在 水深 6 cm 時(shí), 由于水淺, 部分小鼠不僅后爪可觸及 水底, 再加上鼠尾在水缸底部的支撐, 影響了不動(dòng)時(shí) 間的測(cè)定。在水深 15 cm 時(shí), 小鼠的后爪和尾部均 不能觸及水底。而在 10 cm 時(shí), 避免了上述 2 種情 況對(duì)結(jié)果的影響。

因此, 做小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)時(shí), 以選擇體重 20 ~ 24 g 的 ICR 雄性小鼠, 實(shí)驗(yàn)前24 h 進(jìn)行 15 min 的 游泳訓(xùn)練, 且水深為 10 cm 為宜。

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