近段時(shí)間,越來越多的課題涉及到動物睡眠剝奪實(shí)驗(yàn),睡眠是恢復(fù)精力體力所必須的休息,睡眠障礙會影響大腦思維,并導(dǎo)致**發(fā)生,從而使人體從健康狀向亞健康,甚至是**狀態(tài),睡眠剝奪(sleep deprivation,SD)是制作睡眠障礙模型的必備儀器。通過睡眠剝奪模型的制作,課題探討機(jī)體學(xué)習(xí)記憶與**功能的影響機(jī)制。大小鼠睡眠剝奪儀相關(guān)介紹
筆者也看到,目前市場上有很多款式的大小鼠睡眠剝奪儀,功能也都表述大致雷同,今天準(zhǔn)備作一個(gè)總結(jié)如下:
1、水平轉(zhuǎn)盤睡眠剝奪法
此方法應(yīng)用廣泛,于 1983 年*先應(yīng)用在睡眠剝奪實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)裝置由一個(gè)電腦控制臺、一個(gè)水平轉(zhuǎn)盤及兩個(gè)開放的長方形有機(jī)玻璃缸組成,轉(zhuǎn)盤直徑為 46 cm,在電腦控制下可以按順時(shí)針逆時(shí)針方向隨機(jī)水平轉(zhuǎn)動! 兩只有機(jī)玻璃缸的尺寸均為長60 cm ,寬20.5 cm,高 60 cm 。在距離缸底 5 cm 處的缸側(cè)壁開有一條縫隙,使轉(zhuǎn)盤的一半能分別從縫隙伸入兩只玻璃缸中并能隨意轉(zhuǎn)動。缸底留置水約 2 cm 深,轉(zhuǎn)盤離水面約3 cm 實(shí)驗(yàn)前1周將睡眠剝奪大鼠頭頸部植入微電極" 并將微電極與電腦控制臺相連,將大鼠放在轉(zhuǎn)盤上適應(yīng)環(huán)境1周,每天約1 h讓大鼠習(xí)慣在轉(zhuǎn)盤上活動,進(jìn)水,進(jìn)食等。大小鼠睡眠剝奪儀相關(guān)介紹
實(shí)驗(yàn)時(shí)將實(shí)驗(yàn)組的大鼠及對照組的大鼠分別置于兩只缸中的轉(zhuǎn)盤上,當(dāng)電腦通過微電極監(jiān)測到實(shí)驗(yàn)組大鼠進(jìn)入慢波或快波睡眠的腦電信號后,立即發(fā)出指令使轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)動 6 s(6 s內(nèi)轉(zhuǎn)動 1/3 圈),當(dāng)大鼠被轉(zhuǎn)到玻璃缸壁時(shí),因被玻璃缸壁擋住而可能掉入水中,每次在實(shí)驗(yàn)組睡眠剝奪大鼠進(jìn)入睡眠時(shí)轉(zhuǎn)盤即轉(zhuǎn)動 6 s,方向隨機(jī),轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)動時(shí)兩只大鼠均被動地隨著轉(zhuǎn)盤移動。此方法一次只剝奪一只大鼠睡眠,當(dāng)實(shí)驗(yàn)組的睡眠剝奪大鼠在活動、進(jìn)水、進(jìn)食時(shí)轉(zhuǎn)盤并不轉(zhuǎn)動而此時(shí)對照組的大鼠則可趁機(jī)睡覺以彌補(bǔ)被剝奪的睡眠。此方法中睡眠剝奪組大鼠與對照組大鼠條件極其相似,因而可減少因?qū)嶒?yàn)條件不同而所致的應(yīng)激反應(yīng)。大小鼠睡眠剝奪儀相關(guān)介紹
2、改良多平臺睡眠剝奪法
在MMPM 中將 10 只大鼠(具體數(shù)目可根據(jù)實(shí)際需要確定)同時(shí)放在裝有 14 或 15 個(gè)小平臺的水槽中(長 127 cm ,寬 44 cm ,高 45 cm )進(jìn)行實(shí)驗(yàn),這樣既避免了 SP及M P中單只大鼠與群體隔離的缺點(diǎn),又保留了 M P 中活動范圍增大的特點(diǎn),因在實(shí)驗(yàn)時(shí)大鼠多是 3 只或 4 只一籠進(jìn)行飼養(yǎng),如 1 組實(shí)驗(yàn)需 10 只大鼠,則需要3籠或 4籠大鼠,考慮到來自不同籠的大鼠放在一起實(shí)驗(yàn)也可能造成群體的不穩(wěn)定,有學(xué)者將實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)一步改良,將實(shí)驗(yàn)所需的 10 只大鼠放在同一只籠中飼養(yǎng) 2 周,實(shí)驗(yàn)時(shí)再將這些大鼠放在一起同時(shí)進(jìn)行睡眠剝奪實(shí)驗(yàn),這樣以克服實(shí)驗(yàn)時(shí)大鼠群體不穩(wěn)定的缺點(diǎn),從而將實(shí)驗(yàn)時(shí)的不確定因素減至*低。
實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)在MMPM中"經(jīng)采取措施保持大鼠群體穩(wěn)定性及避免大鼠與群體分離后" 大鼠腎上腺重量%體重減輕量%血清中促腎上腺皮質(zhì)**(A CTH )和腎上腺皮質(zhì)酮 (CO RT) 的含量均較M P中為低,提示M M PM 較 M P 具有更低的應(yīng)激性,是較為理想的REM 剝奪方法。
雖然多平臺是嗎剝奪提高了實(shí)驗(yàn)了效率,但是也加大了動物睡眠剝奪過程中的死亡率,同樣效果不理想。大小鼠睡眠剝奪儀相關(guān)介紹
3、水平剝奪桿剝奪方式
在標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室籠中采用間隙性地剝奪桿掃描進(jìn)行觸覺刺激來干擾自由行為的小鼠。該方法防止了人類接觸和干預(yù)對睡眠剝奪的影響,并且在整個(gè)睡眠剝奪過程期間*小化身體活動。此外,該程序準(zhǔn)確且可預(yù)測。實(shí)驗(yàn)室動物從小都是在飼養(yǎng)籠中長大,基于實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)籠使得動物能夠保持在正常的社會環(huán)境中實(shí)施了一種相對無壓力的方法來誘導(dǎo)動物睡眠剝奪模型,從而避免了外界環(huán)境及其他因素對睡眠剝奪的影響。此外,基于飼養(yǎng)籠式的睡眠剝奪儀易于組裝和清洗,設(shè)計(jì)更加的人性化。大小鼠睡眠剝奪儀相關(guān)介紹
這種剝奪方式,無法與行為視頻、光遺傳以及鈣離子成像設(shè)備兼容同步實(shí)驗(yàn),不能夠針對性的策略剝奪。
4、反饋式睡眠剝奪方式
XR-XS108型睡眠剝奪儀通過監(jiān)測動物活動量進(jìn)行反饋式控制,可在動物進(jìn)入特定睡眠階段后再啟動剝奪桿,進(jìn)行睡眠剝奪或破碎,具有反饋式調(diào)節(jié)(軟件控制模式)、程控式調(diào)節(jié)(外控模式)和獨(dú)自工作觸屏調(diào)節(jié)(標(biāo)準(zhǔn)模式)三種工作模式,可用于睡眠剝奪或睡眠破碎動物模型制作,具有精準(zhǔn)調(diào)節(jié)、耗體力小等特點(diǎn)。
1、標(biāo)準(zhǔn)模式:無須連接電腦,5寸觸摸屏操作;
2、外控模式:將睡眠行為與第三方系統(tǒng)(包括進(jìn)口友商的睡眠分析軟件/ EEG/EMG 腦電肌電系統(tǒng))整合,進(jìn)行多元化的有效剝奪;
3、軟件控制模式(選配):配置SuperSleep軟件和攝像頭,可以根據(jù)動物的實(shí)時(shí)活動量情況有效的定制剝奪策略以及剝奪強(qiáng)度;
反饋式睡眠剝奪儀的優(yōu)點(diǎn)是可以根據(jù)動物行為視頻分析的結(jié)果,加上動物腦電信號實(shí)時(shí)同步的睡眠信號,來判定動物的睡眠程度,然后啟動策略性剝奪,是目前*理想有效的睡眠剝奪方式,消耗體力少,剝奪**度高,數(shù)據(jù)豐富。
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