【摘要】 目的 將小動(dòng)物行為學(xué)分析系統(tǒng)用于大鼠曠場實(shí)驗(yàn),并對測定指標(biāo)與傳統(tǒng)的評判標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行相關(guān)性分析, 建立曠場實(shí)驗(yàn)中各指標(biāo)的平均值及 95% 置信區(qū) 間。通過對曠場實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行篩選,減少個(gè)體差異對結(jié)果造成的影響。方法 用小動(dòng)物行為學(xué)分析系統(tǒng)測定分析 3 min 內(nèi)曠場分析箱中大鼠運(yùn)動(dòng)距離和中央?yún)^(qū)域運(yùn)動(dòng)距離,同時(shí)記錄大鼠穿 格數(shù)與中央?yún)^(qū)域停留時(shí)間。結(jié)果 穿格數(shù)與運(yùn)動(dòng)距離相關(guān)性良好( r = 0. 959,P < 0. 01) ,中央?yún)^(qū)域停留時(shí)間與中央?yún)^(qū)域運(yùn)動(dòng)距離相關(guān)性良好( r = 0. 915,P < 0. 01) ,建立了各測定指標(biāo)參考值。結(jié) 論 可以用測定運(yùn)動(dòng)距離和中央?yún)^(qū)域運(yùn)動(dòng)距離代替?zhèn)鹘y(tǒng)的穿格數(shù)和中央?yún)^(qū)域穿格數(shù)。
【關(guān)鍵詞】 小動(dòng)物行為學(xué)分析系統(tǒng);曠場實(shí)驗(yàn);相關(guān)性分析;參考值
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的整體自主行為學(xué)分析研究在毒理學(xué)、精神藥理學(xué)、評估yao物和環(huán)境對動(dòng)物行為的改變及對神經(jīng)系統(tǒng)的作用等領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用。隨著現(xiàn)代計(jì)算機(jī)技術(shù)與圖像分析技術(shù)的發(fā)展,以此類技術(shù)為基礎(chǔ) 的動(dòng)物自動(dòng)行為學(xué)數(shù)據(jù)采集分析成為發(fā)展的趨勢, 但這些新技術(shù)下測定指標(biāo)與原有的是否一致,新的指標(biāo)與傳統(tǒng)測定指標(biāo)間的相關(guān)性如何鮮見報(bào)道。現(xiàn)進(jìn)行 大鼠的曠場實(shí)驗(yàn),對曠場實(shí)驗(yàn)傳統(tǒng)指標(biāo)與小動(dòng)物行為記錄分析系統(tǒng)指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析以確立之間的關(guān)系并建立其參考值范圍。
材料與方法
1. 1 動(dòng)物 Wistar 大鼠,雄性,SPF 級,體 質(zhì) 量 180 ~ 220 g,南 方 醫(yī) 科 大 學(xué) 實(shí) 驗(yàn) 動(dòng) 物 中 心 提 供,合 格 證 號: SCXK(粵)20060015。
1. 2 儀器 小動(dòng)物行為記錄分析系統(tǒng) ;曠場分析箱木板 100 × 100 × 40 cm(長× 寬 × 高),箱底均分為 25 個(gè)方格(20 × 20 cm),內(nèi)部墻壁涂黑,沿墻格稱為外周區(qū)域,其余為中央?yún)^(qū)域。
1. 3 測定條件 行為學(xué)實(shí)驗(yàn)室保持安靜通風(fēng),室內(nèi)暗光,手術(shù)燈照天花板反射到實(shí)驗(yàn)操作區(qū);實(shí)驗(yàn)人員遠(yuǎn)離曠場分析箱(以操作角度看不到箱中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為準(zhǔn))。實(shí)驗(yàn)前,動(dòng)物在測定房間中適應(yīng) 10 min 以上。
1. 4 測定方法 小動(dòng)物行為學(xué)分析系統(tǒng)中將曠場分析箱從左上開始,按左到右順序以不同顏色編號為相同的 25 個(gè)小格,其中 7、8、9、12、13、14、17、18 和 19 為中央?yún)^(qū)域,其余為外周格,13號格為正中格。每次實(shí)驗(yàn)時(shí)捏住大鼠尾巴距根部 2 /3 處輕放入 13 號格中,顯示器中觀察其 3 min 內(nèi) 活 動(dòng) 情 況,每次測定結(jié)束將動(dòng)物排泄物清chu干凈,每只僅測定 1 次。實(shí)驗(yàn)時(shí)間結(jié)束 錄像分析,軟件統(tǒng)計(jì)。
1. 5
統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用 SPSS13. 0 統(tǒng)計(jì)軟件對各項(xiàng)指標(biāo)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn),符合正態(tài)分布者用 x珋± 1. 96 s 計(jì)算正常參考值范圍,不 符合者,用百分位數(shù)法求P 2. 5 ~ P 97. 5 分布范圍。相關(guān)分析的雙變量符合正態(tài)分布者采 用 Pearson 相 關(guān) 分 析,不服從正態(tài)分布用Spearman相關(guān)分析。
2 結(jié)果
2. 1 測定指標(biāo)的平均值
3 討論
曠場實(shí)驗(yàn)是將一定面積劃分為不同區(qū)域,并以相應(yīng)的格子對應(yīng)。大鼠在新環(huán)境中是由緊張、興奮、探索 再到適應(yīng)的一系列過程,興奮性的老鼠在適應(yīng)的環(huán)境中表現(xiàn)為行動(dòng)活躍,四處走動(dòng),留下自身的生物氣息,跨格次數(shù)的多少反應(yīng)其興奮程度??绺翊螖?shù)的多少與動(dòng)物的行動(dòng)量成正比,跨格次數(shù)多,活動(dòng)距離也應(yīng)增加,但由于局限于當(dāng)下實(shí)驗(yàn)條件,以往只能用跨格次數(shù)從側(cè)面反映行動(dòng)的長短。從 3 個(gè)批次實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,礦場實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物總運(yùn)動(dòng)距離和總穿格數(shù)、央?yún)^(qū)域運(yùn)動(dòng)距離與中央?yún)^(qū)域停留時(shí)間都具有良好相關(guān)性,重復(fù)性好,也證明了他們間的對應(yīng)關(guān)系。現(xiàn)在以大鼠總運(yùn)動(dòng)距離等新指標(biāo)應(yīng)能更直接地反應(yīng)動(dòng)物的興奮程度,從而避免了傳統(tǒng)的人為觀察、手工記錄,所造成標(biāo)準(zhǔn)不一致性、主觀性程度大、費(fèi)時(shí)費(fèi)力等缺點(diǎn),也很好的解決了觀察人的行為對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的“二次應(yīng)激”的不足,取得更加真實(shí)準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。