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神經(jīng)科學(xué)研究中動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需要考慮的幾個(gè)問題1

摘要:動(dòng)物行為學(xué)主要側(cè)重于科學(xué)和客觀地研究自然條件下的動(dòng)物行為,是現(xiàn)代神經(jīng)科學(xué)研究的重要技術(shù)之一。神經(jīng)科學(xué)研究中動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需考慮諸多因素,本文檢索綜述國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn),主要探討實(shí)驗(yàn)?zāi)P蛣?dòng)物選擇、動(dòng)物行為模式選擇、降低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物個(gè)體變異及行為學(xué)實(shí)驗(yàn)效度四個(gè)重點(diǎn)考慮的問題。


關(guān)鍵詞:神經(jīng)科學(xué);動(dòng)物行為學(xué);模型動(dòng)物;行為模式;個(gè)體變異;效度


   動(dòng)物行為學(xué)(Ethology)主要側(cè)重于科學(xué)和客觀地研究自然條件下的動(dòng)物行為,研究對(duì)象包括動(dòng)物的溝通行為;情緒表達(dá);社交行為;學(xué)習(xí)行為;繁殖行為等,是現(xiàn)代神經(jīng)科學(xué)研究(Neuroscience)的重要技術(shù)之一。人類是唯yi能夠口頭表達(dá)自我認(rèn)知的動(dòng)物。研究者只有通過(guò)難測(cè)其他動(dòng)物的行為,才能了解它們的感覺和認(rèn)知過(guò)程。經(jīng)過(guò)神經(jīng)科學(xué)、生理學(xué)、心理學(xué)等科學(xué)家對(duì)動(dòng)物行為學(xué)100多年的研究,已開發(fā)出大量的動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)P?;同時(shí),新的針對(duì)特種動(dòng)物行為和神經(jīng)ji病的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)也層出不窮。神經(jīng)科學(xué)研究中動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需考慮諸多因素,本文主要探討實(shí)驗(yàn)?zāi)P蛣?dòng)物(model organism)選擇、動(dòng)物行為模式(behavioral paradigm)選擇、降低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物個(gè)體變異(individual varability)及行為學(xué)實(shí)驗(yàn)效度(validity)問題。

 

1. 實(shí)驗(yàn)?zāi)P蛣?dòng)物選擇

   與以人類為研究對(duì)象的生物醫(yī)學(xué)試驗(yàn)相同,確定開展動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)和選擇實(shí)驗(yàn)?zāi)P蛣?dòng)物時(shí),首先要考慮倫理學(xué)問題,以Zui大努力降低對(duì)動(dòng)物的危害。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方案必須經(jīng)由研究機(jī)構(gòu)動(dòng)物保護(hù)和使用委員會(huì)(Institutional Animal Care and Use Committee,IACUC)審查并批準(zhǔn)同意。目前,國(guó)際通用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利指南包括三項(xiàng)內(nèi)容,簡(jiǎn)稱“3R”:

1)替代(Replacement)指盡可能采用計(jì)算機(jī)模擬、細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)技術(shù)替代動(dòng)物實(shí)驗(yàn),采用低等動(dòng)物替代高等動(dòng)物(如無(wú)脊椎替代脊椎動(dòng)物、嚙齒類替代靈長(zhǎng)類動(dòng)物等);

2)減低(Reduction)指采用Zui少數(shù)量的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物獲取具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義研究數(shù)據(jù),利用一批動(dòng)物完成多項(xiàng)實(shí)驗(yàn);

3)細(xì)化(Refinement)指周密設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟,全程監(jiān)測(cè)并采取措施降低動(dòng)物痛苦及疼痛。其次,選擇模型動(dòng)物要重點(diǎn)考慮動(dòng)物的自然行為能力和研究者設(shè)計(jì)的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法。行為學(xué)研究動(dòng)物執(zhí)行特定行為的自然能力:蠕蟲和果蠅是研究感覺、覓食、運(yùn)動(dòng)神經(jīng)控制等動(dòng)物與環(huán)境交互作用的模型;果蠅也被用于成癮、學(xué)習(xí)、記憶、生物節(jié)律等研究;大鼠和小鼠可完成更為復(fù)雜的認(rèn)知任務(wù),可用于研究情緒、學(xué)習(xí)及社會(huì)行為等;靈長(zhǎng)類動(dòng)物具備gao級(jí)智能行為,可完成復(fù)雜決策、面積識(shí)別等復(fù)雜行為學(xué)實(shí)驗(yàn);蝙蝠、蟾蜍、貓頭鷹等動(dòng)物可用于聽覺、視覺、定位、學(xué)習(xí)及記憶等特殊行為學(xué)實(shí)驗(yàn)。

第三,研究者應(yīng)在整個(gè)實(shí)驗(yàn)背景下選擇模型動(dòng)物。若整個(gè)實(shí)驗(yàn)的目的是篩選與動(dòng)物某一行為相關(guān)的基因,那么模型動(dòng)物應(yīng)選擇蠕蟲、果蠅、大鼠等易于處理的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。若實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖怯涗泟?dòng)物執(zhí)行特定行為大腦內(nèi)神經(jīng)元活動(dòng),模型動(dòng)物應(yīng)選擇大鼠、靈長(zhǎng)類等較大的動(dòng)物。嚙齒類動(dòng)物(大鼠、小鼠等 )因便于完成轉(zhuǎn)基因、分子生物學(xué)和電生理實(shí)驗(yàn),常被用于動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn) 。


2. 動(dòng)物行為模式選擇

選擇實(shí)施和創(chuàng)xin開發(fā)一項(xiàng)動(dòng)物行為模式實(shí)驗(yàn)都需考慮諸多因素。首先,動(dòng)物行為模式必須具備便于定量化測(cè)量的指標(biāo)。如某研究者希望比較兩組嚙齒類動(dòng)物飲酒行為的差異,可供定量化測(cè)量的指標(biāo)有液體總消耗量、液體消耗速率、動(dòng)物飲用次數(shù)等。神經(jīng)科學(xué)行為實(shí)驗(yàn)常探討時(shí)間因素對(duì)動(dòng)物行為的影響,在實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采集、統(tǒng)計(jì)分析及結(jié)果呈現(xiàn)時(shí)應(yīng)將測(cè)量時(shí)間作為重要因素加以考慮,一般采用重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)分析方法探討時(shí)間與干預(yù)間交互作用。再次,研究者必須考慮非預(yù)期原因引起的動(dòng)物異常形為,尤其是經(jīng)過(guò)基因敲除、蛋白表達(dá)修飾、神經(jīng)功能核團(tuán)干預(yù)后的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。如經(jīng)注射某實(shí)驗(yàn)藥wu后的動(dòng)物比注射生理鹽水動(dòng)物完成水迷宮實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng),且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但此種藥wu效應(yīng)可能并非因改變了動(dòng)物空間定位和記憶能力引起,也可能是改變了動(dòng)物活動(dòng)能力,間接地造成水迷宮時(shí)間延長(zhǎng)。因此,在選定動(dòng)物行為模式后,研究者應(yīng)針對(duì)動(dòng)物行為差異的其他可能解釋,補(bǔ)充完善動(dòng)物對(duì)應(yīng)的行為模式實(shí)驗(yàn)。另外,行為學(xué)實(shí)驗(yàn)應(yīng)監(jiān)測(cè)動(dòng)物生理指標(biāo)(體重、心率等),維持動(dòng)物健康狀態(tài),避免因ji病造成動(dòng)物行為異常。

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