摘要：目的探討“醒腦開竅”針刺法對缺血性腦卒中大鼠行為學(xué)影響，為針刺**缺血性腦卒中提供理論依 據(jù)。方法將80只SD大鼠隨機分為電針組、電針對照組、模型組、假手術(shù)組，每組20只。采用熱凝閉法制造大鼠大 腦中動脈閉塞模型。電針刺激在造模成功24 h內(nèi)進行，采取“醒腦開竅”法，電針組取穴水溝、百會和雙側(cè)內(nèi)關(guān)、三陰 交，電針30 min/次，1次/d，每7 d為1療程（連續(xù)針刺6 d，后休息1 d)，共14 d。余各組抓取、固定方法參數(shù)等同 電針組，但不針刺。各組的大鼠在7 d、4 d隨機各取10只進行神經(jīng)功能評估、Barnes記憶分析及滾筒掉落時間觀 察記憶及運動功能。結(jié)果電針后，Barnes記憶持續(xù)時間較模型組顯著延長CP<0.001)，進入隱藏區(qū)的潛伏期較模型 組顯著縮短CP<0.001)，滾筒掉落時間較模型組明顯延長CP<0.001)。結(jié)論“醒腦開竅”針刺的方法能改善缺血性腦 卒中大鼠記憶、運動功能等行為學(xué)。Barnes記憶分析系統(tǒng)及滾筒掉落時間可客觀地反映大鼠記憶及運動功能的變 化，對于電針對大鼠行為學(xué)實驗研宄有重要意義。

腦血管**是威脅人類健康的重大**之一，包 括缺血性和出血性兩類[1]。缺血性腦血管病(ischemic cerebrovascular disease，ICVD)在老年人中具有高發(fā) 病率、患病率、致殘率和死亡率，且發(fā)病逐漸年輕化。 加大腦血管病防治力度，改善預(yù)后，預(yù)防并發(fā)癥，提高 腦血管**的療效是一項刻不容緩的重任。目前，雖 然對ICVD的**取得了較大的進步，在溶栓和（或） 取栓同時，也可使用神經(jīng)保護劑來避免或減少再灌 注損傷，但仍無一種神經(jīng)保護的**可使患者從中 獲益[2]，研究表明電針在ICVD中的應(yīng)用中能促進其 功能恢復(fù)[3]，己是缺血性腦血管病的常規(guī)治法。本實 驗主要通過電針來干預(yù)腦缺血大鼠模型，為針刺** ICVD提供實驗研究依據(jù)。

1材料

1.1實驗動物選擇18月齡，雄性，體質(zhì)量200?250 g的SD大鼠80只，均購買并飼養(yǎng)于安徽中醫(yī) 藥大學(xué)實驗動物中心，預(yù)適應(yīng)1周后方開始實驗。 大鼠選用清潔級顆粒飼料喂養(yǎng)，并予自由飲食及飲 水，視墊料清潔的程度更換墊料。飼料和墊料均購買于安徽中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心，飼養(yǎng)環(huán)境模擬 標(biāo)準(zhǔn)日夜系統(tǒng)。

1.2實驗儀器G6805型電針**儀：蘇州醫(yī)療用 品廠有限公司；電凝器；牙科鉆；華佗牌一次性針灸 針：蘇州，規(guī)格為直徑0.2 mm，針身長0.5寸；Barnes 迷宮測試板、圓形滾筒：上海欣軟XR-XB108型巴恩斯迷宮視頻分析系統(tǒng)。

2實驗方法

2.1實驗分組80只SD大鼠隨機分為假手術(shù)組(該組只行血管分離）、模型組、電針對照組、電針組， 每組20只。

2.2大腦中動脈閉塞大鼠模型的建立及成功與否檢測的方法在室溫25 °C條件下，SD大鼠稱重后，根 據(jù)羅燕等[4]提出的熱凝閉大腦中動脈法制造局灶性 腦缺血大鼠模型：將SD大鼠右側(cè)臥位固定于手術(shù)臺 上，去除左側(cè)顳頂部的鼠毛，碘伏對顳頂部局部皮膚 **。左眼與左耳之間切開皮膚，鈍性分離顳肌，暴露 出顳骨翼板，術(shù)中避免損傷周圍血管及神經(jīng)等。用牙 科鉆經(jīng)顳骨翼板鉆至硬腦膜，用小咬骨鉗向下咬去部分顱骨，暴露大腦中動脈，用電凝器來凝閉大腦中動 脈(嗅束到大腦下靜脈），后縫合顳肌及皮膚。

假手術(shù)組：同上操作到暴露大腦中動脈，不進行 熱凝閉。大鼠蘇醒后參照Zea Longa E等提出的神經(jīng)行 為學(xué)評估法進行評分，評分1~3分表示造模成功，采 用差額補充的方法保證每組實驗的例數(shù)。

2.3處理方法電針組：造模成功后將不予麻醉的 大鼠固定在自制鼠夾上。根據(jù)華興邦等[6]制定的大 鼠針灸穴位進行定位，選用“醒腦開竅”針刺法，主 穴取水溝、百會和雙側(cè)內(nèi)關(guān)、三陰交。先用捻轉(zhuǎn)、提插 瀉法刺激雙側(cè)內(nèi)關(guān)1 mm至筋間，刺激1 min，留針 30 min;次用雀啄法由鼻中隔下部向上斜刺水溝1 mm，強刺激1 min;再應(yīng)用提插法直刺三陰交5 mm， 持續(xù)1 min;*后刺百會穴，取向前或向后斜刺2 mm，采用平補平瀉捻轉(zhuǎn)手法刺激1 min，留針30 min。留針期間，分別用G6805電針**儀連接內(nèi)關(guān) 和三陰交穴位的針柄，施以疏密波，調(diào)整電壓為2~4 V，頻率為2/100 Hz，以針刺部位輕微抖動為刺激強 度。第1次針刺在造模成功后的24 h內(nèi)進行，以后每 天上午固定時間針刺1次，每7 d為1個療程（連續(xù) 針刺6 d，休息1 d)[8。

電針對照組:SD大鼠不進行任何手術(shù)，抓取、固 定方法、針刺穴位、方法、頻率、電針刺激參數(shù)等同電 針**組。

假手術(shù)組、模型組:抓取、固定方法參數(shù)等同電針 組，但不進行針刺。

2.4觀察指標(biāo)

2.4.1大鼠神經(jīng)行為學(xué)評分[5] 0分：無神經(jīng)缺損癥狀；1分：將大鼠提尾倒懸時，左側(cè)前爪不能完全伸 展;2分：爬行時左側(cè)轉(zhuǎn)圈；3分：行走困難、向左側(cè)傾 倒;4分:不能自發(fā)行走，意識喪失。

2.4.2 Barnes記憶分析系統(tǒng)檢測訓(xùn)練過程:將大鼠 逐只放在圓形漆黑Barnes迷宮測試板上，測試板的 周圍有20個洞口，底部放置底盒的一個洞口稱之為 隱藏區(qū)，其余稱之為暴露區(qū)，每次訓(xùn)練開始時將大鼠 放置于隱藏區(qū)，讓其適應(yīng)30 s，然后將其放在迷宮中 央，自由選擇進入隱藏區(qū)，每次訓(xùn)練240 s，每只老鼠 做完以后都用酒精對迷宮進行擦拭。每天下午每只大 鼠連續(xù)訓(xùn)練2次，連續(xù)訓(xùn)練6 d。

測試過程：第1 d訓(xùn)練結(jié)束后按分組測試，然后 連續(xù)訓(xùn)練6 d后第7 d開始測試，按分組開始測試， 測試過程同訓(xùn)練過程，每只測試2次，Barnes迷宮反映了動物的空間記憶功能。

2.4.3滾筒掉落時間檢測選用直徑20 cm圓形滾 筒，設(shè)定轉(zhuǎn)速為5轉(zhuǎn)/min，測試時間為5 min，按照分 組將大鼠放在滾筒中，傾斜60。，每次可測試3只大 鼠，每只測試3次，記錄大鼠掉落平臺時間，*長測試 時間為 5 min。

2.5統(tǒng)計學(xué)方法所有計量資料均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn) 差（X± s)表示，Barnes記憶持續(xù)時間、大鼠進入隱藏 區(qū)的次數(shù)、進入的潛伏期以及滾筒掉落時間等參數(shù) 的比較采用單因素方差分析。統(tǒng)計結(jié)果，均由SPSS for windows 19.0自動運算完成。P<0.01為有顯著統(tǒng) 計學(xué)意義，P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05為無統(tǒng) 計學(xué)意義。