1 材料和方法

1. 1  主要儀器

曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)裝置( 上海欣軟信息科技有限公司) ， FST 裝置( 上海欣軟信息科技有限公司) ，高效液相色譜儀( Agilent 1100，美國(guó) Agilent 公司) ，電化學(xué)檢測(cè)器( Coulochem ，美國(guó) ESA 公司) ; 新芝電動(dòng)玻璃勻漿器( DY89 － 型，寧波新芝生物科技公司) ; 中佳高速冷凍離心機(jī)( HC － 3018Ｒ，安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司) ; Millipore 超純水機(jī) ( 美國(guó) Millipore公司) 。強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)對(duì)慢性不可預(yù)知溫和刺激誘導(dǎo)的大鼠抑郁行為和神經(jīng)遞質(zhì)水平的影響

1. 2  試劑

Ica( 中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào): 110753-201211) ，DA ( Sigma 公司，批號(hào): BCBC7614V) ，NA( Sigma 公司，批號(hào): 099K1222V) ，鹽酸氟西汀分散片( 禮來蘇州制藥有限公司，批號(hào): S1S9A) ; 內(nèi)標(biāo)物3，4-二羥基芐胺 ( Sigma 公司，批號(hào): MKAA3430 ) ，5-HT( Sigma 公司，批號(hào): 112H0781) 。

1. 3  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選取 SPF 級(jí)雄性 SD 成年大鼠 60 只，180 ～ 220 g［廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物合格證號(hào): SCXK( 粵) 2013-0002］。

1. 4  動(dòng)物分組及模型建立60 只大鼠隨機(jī)分為 6 組，即正常組，模型組，氟 西汀對(duì)照組( 10 mg·kg ^－ 1 ) ，Ica 低( 10 mg·kg ^－ 1 ) ，中( 20 mg·kg ^－ 1 ) ，高( 40 mg·kg ^－ 1 ) 劑量組，每組 10 只大鼠。各組大鼠實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)環(huán)境 1 周，然后進(jìn)為期 42 d 的慢性不可預(yù)知溫和性刺激 。正常組大鼠不給予任何刺激，正常攝食飲水。每天采用一種方式對(duì)其余 5 組大鼠進(jìn)行應(yīng)激處理，避免連續(xù) 2 d 重復(fù)。應(yīng)激處理方式包括以下 9 種: 鼠籠傾斜 45° /24 h、束縛 1 h、夾尾 1 min、晝夜顛倒、禁水 24 h、潮濕墊 料 24 h、足底電擊 5 min( 每次 3 s，休息 7 s) 、禁食 24 h、4 冰水游泳 5 min。應(yīng)激處理 21 d 后開始灌胃給藥，連續(xù) 21 d，每天 1 次，給藥間期持續(xù)應(yīng)激處理，模型組和空白組大鼠每天灌胃等體積的空白溶劑。

1. 5  糖水偏愛實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)分為 4 d 進(jìn)行。第 1 天適應(yīng)性訓(xùn)練，在籠子上放置 2 個(gè)玻瓶，均為 1% ( W / V) 糖水，24 h 后( 第 2 天) 將其中 1 瓶糖水換成純水，自由攝取 24 h。第 3 天，大鼠禁水禁食 24 h。第 4 天，在籠子上放置 2 個(gè)玻瓶，1 瓶為 20 mL 1% 糖水，另 1 瓶為 20 mL 純水，大鼠自由攝取 2 h。實(shí)驗(yàn)開始之前稱量每個(gè)玻瓶的重量。2 h 后，再次測(cè)量玻瓶的重量，2 次重量相減得出糖水和純水的消耗量( g) 。

1. 7  FST強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)

試驗(yàn)裝置為高 50 cm，直徑 25 cm 的圓柱形透明塑料桶。塑料桶裝入 30 cm 高，( 23 ± 3) 的溫水。實(shí)驗(yàn)分為 2 d，第 1 天為適應(yīng)性訓(xùn)練，將大鼠放入水中，使其后肢無(wú)法接觸桶底，適應(yīng) 6 min。第 2 天，同樣條件下讓大鼠自由游泳 6 min，記錄后 4 min 內(nèi)大鼠的不動(dòng)時(shí)間( 大鼠漂浮于水面或僅做一些細(xì)小肢體活動(dòng)支持其浮在水面) 。強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)對(duì)慢性不可預(yù)知溫和刺激誘導(dǎo)的大鼠抑郁行為和神經(jīng)遞質(zhì)水平的影響

3 討 論

抑郁癥發(fā)病率逐年上升，重癥抑郁癥患者會(huì)產(chǎn)生**傾向，嚴(yán)重危害患者的生命健康。在動(dòng)物身上模擬抑郁癥的發(fā)病過程是一大難點(diǎn)。CUMS 模型

是一種經(jīng)典的抑郁癥模型 。CUMS 大鼠在造模成功后的行為與長(zhǎng)期暴露在多重壓力下的人類所表現(xiàn)的抑郁癥臨床表現(xiàn)極為相似。本實(shí)驗(yàn)在經(jīng)過慢性應(yīng)激成功建立了大鼠抑郁模型，自主活動(dòng)減少。