目的:探討音頻電對(duì)急性低壓缺氧引起學(xué)習(xí)記憶障礙的保護(hù)作用。
方法:采用小鼠避暗實(shí)驗(yàn)法及自主活動(dòng)法,觀察音頻中療法對(duì)急性低壓缺氧小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響。
結(jié)果:音頻電及音頻電+低壓缺氧組與相應(yīng)的對(duì)照組比較,錯(cuò)誤次數(shù)(M)明顯減少,潛伏期(EL)顯著延長(zhǎng);音頻電+低壓缺氧組與模型組比較,自主活動(dòng)增加。
結(jié)論:音頻電預(yù)防性**可改善由低壓缺氧造成的記憶功能損害,并對(duì)急性缺氧所致的**抑制有改善作用。
20世紀(jì)70年代以來,音頻電療法在臨床上廣泛應(yīng)用,主要是通過調(diào)節(jié)外周或**神經(jīng)系統(tǒng)達(dá)到促進(jìn)神經(jīng)功能的恢復(fù)。急性低壓缺氧可致腦組織損傷引起學(xué)習(xí)記憶障礙已被證實(shí),但音頻電療法對(duì)急性低壓缺氧引起學(xué)習(xí)記憶障礙的影響研究甚少,國內(nèi)外未見報(bào)道。筆者利用小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙模型,采用避暗實(shí)驗(yàn)和自主活動(dòng)法,觀察音頻電療法對(duì)急性低壓缺氧小鼠學(xué)習(xí)記憶功能障礙的改善作用。
1材料與方法
1.1材料
昆明種小鼠48只,雌雄各半,體重((20 +}) g,由白求恩醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。小鼠稱重后隨機(jī)分成4組,每組12只,即對(duì)照組、模型(低壓缺氧)組、音頻電組和音頻電+低壓缺氧組。適應(yīng)環(huán)境3d后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
小鼠避暗實(shí)驗(yàn)視頻分析系統(tǒng)、小鼠自主活動(dòng)視頻分析系統(tǒng)(上海欣軟信息科技有限公司制造);動(dòng)物低壓艙室(空軍航空醫(yī)學(xué)研究所制造);3音頻電療機(jī)(上海醫(yī)用電子儀器廠生產(chǎn))。
1.2方法
1. 2.1音頻電**
裝鼠容器為直徑20 cm、高15 cm的圓形、平底玻璃器皿,底部放入2層濾紙,為導(dǎo)電用10ml水將濾紙濕透。音頻電療機(jī)的2個(gè)輸出電極置于濾紙下,電極間電阻為70 歐姆,每次將5只小鼠放入玻璃容器內(nèi)2 min后,給予音頻電**15 min,頻率為2 000 Hz,刺激強(qiáng)度分別為2 ,3 ,4 mA,每種強(qiáng)度刺激5 min,共**15 d。第15天,音頻電組及音頻電+低壓缺氧組在音頻電**30 min后,行小鼠避暗的學(xué)習(xí)和自主活動(dòng)的測(cè)試。24 h后,音頻電+低壓缺氧組行音頻電**,再進(jìn)行缺氧實(shí)驗(yàn)。
1.2.2急性低壓缺氧實(shí)驗(yàn)
將模型組和音頻電+低壓缺氧組的小鼠同時(shí)置于動(dòng)物低壓艙內(nèi),以30 m/s的速度上升至8. 0 km高度,停留30 min后,以30 m/s速度降到地面,2h后分別行小鼠避暗記憶功能和自主活動(dòng)測(cè)定。
1.2.3小鼠避暗實(shí)驗(yàn)
依據(jù)文獻(xiàn)將小鼠置于避暗實(shí)驗(yàn)儀中,記錄小鼠進(jìn)入暗室受到電擊的M和EL, , 24 h后進(jìn)行急性低壓缺氧實(shí)驗(yàn),然后再重復(fù)避暗實(shí)驗(yàn),記錄受電擊的M和EL,,以此評(píng)價(jià)小鼠學(xué)習(xí)和記憶功能。
1.2.4小鼠自主活動(dòng)測(cè)定
將小鼠置于自主活動(dòng)自動(dòng)記錄箱中,記錄5 min內(nèi)活動(dòng)次數(shù)。
結(jié)果以平均值士標(biāo)準(zhǔn)差表示,均數(shù)間差異用,檢驗(yàn)。
2結(jié)果
2.1避暗實(shí)驗(yàn)及音頻電作用的影響
經(jīng)音頻電**15d后,在避暗訓(xùn)練中,音頻電組及音頻電+低壓缺氧組的學(xué)習(xí)成績(jī)優(yōu)于對(duì)照組和模型組,M明顯減少,EL延長(zhǎng);24 h后經(jīng)急性低壓缺氧實(shí)驗(yàn),再對(duì)小鼠進(jìn)行記憶功能測(cè)定,結(jié)果模型組與對(duì)照組相比川顯著增多,EL,明顯縮短;音頻電組與對(duì)照組相比川明顯減少,EL,明顯延長(zhǎng);音頻電+低壓缺氧組與模型組比較,M顯著減少,EL顯著延長(zhǎng),結(jié)果見表1。
2. 2小鼠自主活動(dòng)測(cè)定
小鼠自動(dòng)活動(dòng)測(cè)得結(jié)果為模型組與對(duì)照組、音頻電組及音頻電+低壓缺氧組比較,小鼠自主活動(dòng)明顯減少(P<0.01) ;音頻電組小鼠自主活動(dòng)減少,但與對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,結(jié)果見表2。
3討論
目前,臨床上對(duì)缺氧的**方法有多種,如細(xì)胞色素C、高壓氧療法等,但對(duì)其預(yù)防性**的方法卻很少見。本實(shí)驗(yàn)利用音頻電對(duì)正常及變性神經(jīng)、肌肉的興奮作用,探討了音頻電對(duì)急性低壓缺氧導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶障礙有無預(yù)防性作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,音頻電對(duì)急性低壓缺氧導(dǎo)致的學(xué)習(xí)記憶障礙有一定的預(yù)防作用。
實(shí)驗(yàn)中,由于小鼠處于玻璃容器內(nèi),四肢接觸濕濾紙,音頻電流可通過濾紙傳到小鼠全身。哺乳動(dòng)物神經(jīng)和骨骼肌的**不應(yīng)期為0.5^-2 ms,實(shí)驗(yàn)中的音頻電流是脈沖為2 000 Hz的等幅正弦交流電,每?jī)蓚€(gè)脈沖間隔時(shí)間為0. 5 ms,所以綜合2^-4個(gè)脈沖電流刺激能落在神經(jīng)、肌肉的**不應(yīng)期后,使小鼠全身神經(jīng)、肌肉產(chǎn)生興奮,進(jìn)而促進(jìn)腦細(xì)胞、肌細(xì)胞的活動(dòng)加強(qiáng),代謝率提高,從而可抵消缺氧造成的部分損害。另外,音頻電療后,局部血管先收縮后擴(kuò)張,尤其是****密度增加、口徑增寬,這樣可促進(jìn)血液循環(huán)「‘,7」,其作用可能增加腦血流量,改善缺氧時(shí)能量代謝,調(diào)節(jié)相關(guān)代謝產(chǎn)物及改善神經(jīng)纖維傳導(dǎo)功能,使**抑制的活動(dòng)減少得到改善。
**神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì)與學(xué)習(xí)記憶有關(guān)。有文獻(xiàn)報(bào)道,動(dòng)物學(xué)習(xí)訓(xùn)練后,注射中、小劑量擬膽堿藥毒扁豆堿,能顯著改變正常體內(nèi)或?qū)﹂L(zhǎng)時(shí)記憶的貯存和再現(xiàn)能力;而注射抗膽堿藥東蓖膽堿,可使學(xué)習(xí)記憶減退。本實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用的音頻電療法,屬于中頻電療的一種,其可通過刺激神經(jīng),使神經(jīng)組織釋放出小量的P物質(zhì)和乙酞膽堿,因此音頻電預(yù)防性**能對(duì)抗因急性缺氧導(dǎo)致的記憶功能減退,可能與其促進(jìn)神經(jīng)元釋放的乙酞膽堿有關(guān)。