鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)方法新進(jìn)展:
1、熱刺激法:系利用一定強(qiáng)度的溫度來刺激動物軀體的某一體部位,使其產(chǎn)生疼痛反應(yīng)。常用方法有輻射熱測痛法(大白鼠或小白鼠輻射熱致痛引起甩尾反應(yīng))、小白鼠熱板法等。
(1)輻射熱刺激法(又稱光熱法):用小型聚光燈產(chǎn)生一定強(qiáng)度的光束,通過透鏡聚焦照射大白鼠(或小白鼠)的尾巴或家兔鼻部來致痛。大白鼠以甩尾時(shí)間為痛反應(yīng)指標(biāo),家兔則以甩頭為痛反應(yīng)指標(biāo)。此法儀器裝置簡單,反應(yīng)靈敏;若固定照射時(shí)間能準(zhǔn)確測出閾值及刺激強(qiáng)度。對篩選麻醉性鎮(zhèn)痛藥及非麻醉性鎮(zhèn)痛藥均適用。
(2)小鼠熱板法:儀器使用冷熱板測痛儀,小鼠的足底無毛,皮膚裸露,在溫度為55±0.5℃的金屬板上產(chǎn)生疼痛反應(yīng),表現(xiàn)為舔后足、踢后腿等現(xiàn)象。此法儀器裝置簡單,指標(biāo)明確;痛反應(yīng)潛伏期長,便于觀察及測出**之間的較小差異,有利于比較**鎮(zhèn)痛作用的強(qiáng)弱、快慢及持續(xù)時(shí)間。是目前常用的方法之一。主要用于篩選麻醉性鎮(zhèn)痛藥
2、化學(xué)刺激法:許多化學(xué)物質(zhì)如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、鉀離子、緩激肽等,接觸到完整的皮膚和粘膜時(shí),即引起疼痛反應(yīng)。因此,將某些化學(xué)物質(zhì)涂布于開口的皮泡基部暴露的神經(jīng)末梢上或注入動脈、靜脈或腹腔內(nèi),均可造成疼痛模型,作為研究疼痛生理及篩選鎮(zhèn)痛**的方法。
(1)小鼠扭體法:應(yīng)用有些化學(xué)刺激物注入小鼠腹腔內(nèi),引起深部的、大面積而較持久的疼痛刺激,致使小鼠產(chǎn)生“扭體”反應(yīng)(腹部內(nèi)凹、軀干與后腿伸張、臀部高起)。本法對篩選弱鎮(zhèn)痛藥是一種敏感、簡便、重復(fù)性好的方法,但缺乏特異性。
(2)鉀離子皮下透入致痛法:飽和氯化鉀溶液,采用一定強(qiáng)度的直流電經(jīng)動物不同部位的皮下透入,可使家兔縮腿、掙扎、揚(yáng)爪,或使大鼠甩尾、嘶叫等,均可作為致痛的指標(biāo)。此法簡便靈活,輸入電流強(qiáng)度與鉀離子透入及其引起的痛反應(yīng)呈正比,在研究疼痛生理中較多采用。
(3)緩激肽動脈注射法:動脈內(nèi)逆行注入緩激肽,使動物產(chǎn)生一些癥狀,稱為假情感反應(yīng),表現(xiàn)有嘶叫、肢體屈曲、呼吸加深、血壓升高、角膜反射與膝反射陽性等,可作為測定鎮(zhèn)痛藥的指標(biāo)。此法可以用作鑒別外周作用的實(shí)驗(yàn)方法。
3、機(jī)械刺激法:對大鼠或小鼠尾根或尾尖施加一定的壓力,可產(chǎn)生嘶叫,以此作為痛反應(yīng)的指標(biāo)。此法指標(biāo)明確,使用簡便,是篩選鎮(zhèn)痛藥的常用方法之一。本法主要有大鼠尾尖壓痛法和小鼠尾根壓痛法。
4、電刺激法:系采用電刺激器進(jìn)行刺激,引起疼痛反應(yīng)。本法的優(yōu)點(diǎn)是無論弱效或強(qiáng)效**的鎮(zhèn)痛效應(yīng)都能測定出來。缺點(diǎn)是機(jī)體阻止的阻抗易變而不易控制,而且電刺激法敏感性不很高,其反應(yīng)的變化與多種因素有關(guān),如年齡、性別、種族及用藥前的閾值等。此外,電擊致痛還包含反射性因素,因而臨床上沒有鎮(zhèn)痛作用的**,當(dāng)用本法測定時(shí)也可能出現(xiàn)陽性反應(yīng)。與機(jī)械刺激法比較,對電刺激法的評價(jià)是嚴(yán)謹(jǐn)不足。
(1)齒髓刺激法:目前公認(rèn)牙髓神經(jīng)是對痛頗敏感的刺激部位,其痛反應(yīng)近似臨床病理性疼痛。因此認(rèn)為齒髓刺激法是評價(jià)鎮(zhèn)痛藥的標(biāo)準(zhǔn)而可靠的方法。動物在麻醉下用電鉆在牙齒上鉆孔后,將電極插入齒髓作慢性埋藏電極。電刺激時(shí),動物因疼痛會引起咀嚼運(yùn)動與擺頭等反應(yīng),這些反應(yīng)可作為痛閾的指標(biāo)。本法操作簡便,所測得的鎮(zhèn)痛強(qiáng)度及持續(xù)時(shí)間,與臨床觀察一致,可作為模擬病理性疼痛的一種有價(jià)值的敏感方法。
(2)小鼠尾刺激法:儀器使用鼠尾光照測痛儀,電刺激小鼠尾部時(shí),會引起小鼠嘶叫反應(yīng),以此作為痛反應(yīng)指標(biāo)。此法反應(yīng)靈敏,對多數(shù)鎮(zhèn)痛**都適用。鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)方法新進(jìn)展