震驚條件反射實(shí)驗(yàn)方法
1、 基本原理:震驚反射是哺乳動(dòng)物對(duì)外界刺激自然產(chǎn)生的簡(jiǎn)單行為反應(yīng),也是評(píng)價(jià)動(dòng)物反應(yīng)性的一個(gè)敏感指標(biāo)。它包括始于頭部和尾巴的一些列快速運(yùn)動(dòng):隨著聲音刺激的產(chǎn)生和增強(qiáng),動(dòng)物主要肌群出現(xiàn)收縮和舒張??菇箲]的**使這種反應(yīng)減弱、幅度降低,致焦慮劑則相反。
2、 PPI(前脈沖抑制):短暫而強(qiáng)烈(一般大于80dB)的聽覺(jué)刺激可以引起震驚反射。在強(qiáng)的震驚反射刺激出現(xiàn)之前20~500ms內(nèi)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物施加一個(gè)本身不能引起震驚反射的聲音刺激,可以將震驚的幅度減小80%。這種在強(qiáng)烈的震驚反射刺激出現(xiàn)前的一段時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)的若感覺(jué)刺激對(duì)震驚反射的抑制作用就叫做PPI。
3、 PPI測(cè)試通常使用聽覺(jué)刺激模式,通常采用爆破白噪音,常用刺激序列如下:每一輪刺激剛開始時(shí)讓受試對(duì)象適應(yīng)一定強(qiáng)度的背景噪音,且持續(xù)在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,首先給予僅有強(qiáng)刺激的小實(shí)驗(yàn),然后給出弱刺激與強(qiáng)刺激為不同時(shí)間間隔的一系列小實(shí)驗(yàn),小實(shí)驗(yàn)順序以隨機(jī)方式給出,每?jī)蓚€(gè)小實(shí)驗(yàn)之間的時(shí)間間隔為8~30s或更長(zhǎng)(通常為15~20s),以便后面的刺激是作為新奇刺激出現(xiàn)的,避免了前面刺激產(chǎn)生的不應(yīng)期對(duì)后面刺激的影響,而且隨機(jī)變化的實(shí)驗(yàn)間隔時(shí)間較固定間隔更少出現(xiàn)驚跳反射的適應(yīng)性。
4、 為保證聲音刺激和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,設(shè)備應(yīng)配備標(biāo)準(zhǔn)儀器,在每次實(shí)驗(yàn)前用標(biāo)準(zhǔn)儀器對(duì)設(shè)備進(jìn)行校準(zhǔn)。
范例一:
簡(jiǎn)介:用雄性的wistar大鼠,體重約200g,實(shí)驗(yàn)用一個(gè)特制的裝置,包括:
(1) 數(shù)個(gè)敞開的籠子(8cm*8cm*16cm);
(2) 一個(gè)隔音箱,內(nèi)有四個(gè)平臺(tái),并裝有一排風(fēng)扇,可給箱內(nèi)提供50dB(SPL)的噪聲。箱頂部離動(dòng)物14cm高處有一個(gè)揚(yáng)聲器產(chǎn)生白噪聲;
(3) 應(yīng)變計(jì)(strain gauge);
(4) 電腦
實(shí)驗(yàn)流程:
將大鼠單個(gè)放入籠內(nèi),籠可限制大鼠運(yùn)動(dòng),但不固定大鼠。然后將籠置于隔音箱平臺(tái),使大鼠安靜地適應(yīng)5min。
聲音刺激由98dB和120dB(持續(xù)20ms)的突發(fā)噪聲組成。每一聲刺激產(chǎn)生的同時(shí),測(cè)定200ms內(nèi)大鼠的反應(yīng)。
通過(guò)應(yīng)變計(jì)測(cè)定大鼠在籠內(nèi)的軀體運(yùn)動(dòng),以電壓變化表示,并經(jīng)過(guò)數(shù)字模擬轉(zhuǎn)換為重量(g)變化,計(jì)算機(jī)自動(dòng)記錄數(shù)據(jù)。刺激后200ms的*大重量變化為
震驚峰值,同一刺激重復(fù)12次得出
平均峰值。一個(gè)實(shí)驗(yàn)間期包括每個(gè)刺激強(qiáng)度隨機(jī)重復(fù)12次,刺激間隔為20~40s(隨機(jī)出現(xiàn))。實(shí)驗(yàn)前測(cè)一次作為對(duì)照值,結(jié)果用給藥后的測(cè)定值占給藥前值的百分比表示。
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范例二:Spontaneous Nicotine Withdrawal Potentiates the Effects of Stress in Rats
流程:分為兩個(gè)獨(dú)立的階段(session)
1、 大鼠置于震驚籠,在昏暗條件下安靜地適應(yīng)5min,
2、 然后大鼠實(shí)施30次震驚刺激,90、95和105dB分別10次(?),平均刺激間隔時(shí)間30s,偽隨機(jī)順序(pseudorandom),黑暗環(huán)境,為**階段震驚實(shí)驗(yàn)。
3、 隨后大鼠被從實(shí)驗(yàn)籠中取出再置于飼養(yǎng)籠中,也是暗環(huán)境安靜適應(yīng)5min或15min。
4、 然后大鼠重新放入震驚籠中,準(zhǔn)備**階段的實(shí)驗(yàn)
5、 **階段的實(shí)驗(yàn)與**階段完全一致,除了一個(gè)是在暗環(huán)境下,一個(gè)是在明亮環(huán)境下
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